上海细胞库
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| 规格 | 价格 | 库存 |
|---|---|---|
| T25 | ￥ 1800.00 | 1 |
| 产品名称 | 人急性骨髓性白血病细胞KG-1A(STR鉴定正确) | ||
| 生长特性 | 悬浮，淋巴细胞样 | 冻存条件 | 无血清冻存液 |
| 培养体系 | IMDM+20%FBS | ||
| 传代方法 | 第一次建议1:2传代 | 传代情况 | 2~3天换液/传代 |
| 备注 | 悬浮细胞请离心收集，切勿直接倒掉细胞培养液，用无菌离心管收集瓶子培养基作过渡对比培养，如对比培养效果不好，建议直接购买我们的完全培养基 | ||
培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是运输细胞的最好办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶，消毒后放到超净台内严格无菌操作，将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处理。显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（最好40x,100x,200x各一张），前三天照片是重要售后依据，不提供照片默认收到状态良好。（传代后建议一瓶用原瓶的完全培养基，另外一瓶用自己配的完全培养基，以便进行对比培养，换液后将盖子拧松）
三、细胞培养步骤
细胞传代：如果未超过80%汇合度时，将瓶装的完全培养液收集至离心管中，留5ml完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；如果细胞密度超80%，即可进行传代培养，传代具体步骤如下细胞传代：
a、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
b、细胞冻存：
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，将T25 培养瓶中的悬液收集至离心管中1000rpm
离心5min；
2、弃上清，沉淀细胞加入1ml/支的雅吉生物无血清冻存液（C7001），混匀后加入冻存管中。（如：冻一支，加入 1ml 无血清冻存液即可）
3、将冻存细胞直接放入－80℃冰箱即可；如后期要将细胞转入液氮罐中，需在-80℃冰箱存
放 24 小时以上。
C、细胞复苏：
1、从液氮中取出细胞冻存管（注意佩戴防护面具），快速将其置入 37℃水浴中解冻， 直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 完全培养基的15ml离心管中，1000rpm离心5min；
3、弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种至T25培养瓶，放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养；
4、第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
