规格 | 价格 | 库存 |
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5×10^5cells/T25培养瓶 | ¥ 3580.00 | 1 |
使用方法
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:取出细胞培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。2、细胞传代:待细胞达到一定密度(不超过1x10^6/ml)可按照以下方法换液培养或传代。方法①:收集细胞,1000rpm离心5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。方法②:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。贴壁细胞需要用胰酶进行消化。3、细胞冻存:1)将细胞悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;2)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;3)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。4、细胞复苏:1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;2)将冻存管中的细胞移至含10ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。注:悬浮细胞运输中会有少些细胞因为碰撞裂解产生碎片,收到细胞如碎片较多时,胎牛血清可以用15%培养三天,利于细胞尽快恢复状态,细胞稳定后再调回10%即可。