规格 | 价格 | 库存 |
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1×10^6cells/T25培养瓶 | ¥ 6200.00 | 1 |
细胞名称
人视网膜微血管内皮细胞-永生化
货号
YS0884
种属
人
组织来源
视网膜
永生化方法
转入 Sv40 和 hTERT 基因
生长方式
贴壁
安全性
所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护
培养
培养基:内皮细胞专用培养液
配套培养基:(YS-1304)
温度:37℃
气相:95%空气,5%二氧化碳
传代
收到细胞后,请对细胞培养瓶外表进行消毒,将细胞置于培养箱中进行 1-2 小时的缓
冲,待细胞恢复基本生长状态后,进行后续细胞实验。
在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况:
(一)细胞未长至 85%时,用 75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到生物操作台内,严格无
菌操作,打开细胞培养瓶,若培养瓶上无特殊标注,吸去剩余培养液,只留 6-8ml培
养液继续培养。
(二)细胞已长满(达 85-95%)。即可进行传代,具体步骤如下:
1.弃去培养液,用 PBS 洗涤 1-2 次,
2.加入 1.0ml 胰酶消化液,37℃消化,显微镜下观察细胞消化情况,若细胞回缩变圆、
透亮、轻拍甁壁呈流沙样脱落,则迅速拿回操作台,加入双倍的含 10%血清的完全培
养液,终止消化并轻轻吹打细胞,使其变成单细胞悬液,
3.将细胞收集于离心管中离心 1000rmp/5min,弃上清,轻弹管底,将细胞弹散,
4.加入新鲜培养液重悬细胞,进行传代、冻存,
5.如果没有特别说明,建议收到细胞后的第一次传代比例为 1:2。
注:1.观察细胞密度最好用(4X物镜)低倍镜观察,以便正确的判断细胞密度;观
察细胞形态请用(10X 或 20X)高倍镜观察;
2.瓶中运输的培养液不能重复使用,请换新鲜培养液培养;
3.有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心重悬后接种到新瓶内;
4.收到细胞后,若发现培养瓶破损、漏液及细胞污染,请及时与我们联系。
保存
冻存条件:70%基础培养液+20%胎牛血清+10%DMSO
保存条件:液氮存储
供应限制
仅供研究之用
常见问题
1.培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师
及
解决。
解决方案