产品分类/PRODUCT CLASSIFICATION
| 规格 | 价格 | 库存 |
|---|---|---|
| T25 | ￥ 2500.00 | 2 |
细胞来源
ATCC
冻存条件
细胞库无血清冻存液
细胞背景
STR鉴定正确
该细胞系是由A.F. Gazdar、H.K. Oie、J.D. Minna及其同事从一名58岁白色男性吸烟肺癌患者治疗前获得的。 这是一种亚三倍体人类细胞系，其模态染色体数出现在 68% 的计数细胞中。多倍体细胞发生率为 3.0%；所有细胞共有 11 条标记染色体，其中两条是配对的。标记包括：der(6)(q13)、t(7p17q)、del(10)(p11.23)、配对 der(7)t(7;?17)(p22;?q21.1) 和 der( 16)t(16;?)(q24;?) 和其他六个；正常 Y、N13、N15 和 N16 不存在；X染色体大多是成对的。这些细胞携带 TP53 基因密码子 191 的突变。细胞不能合成肽神经调节蛋白 B (NMB) 或胃泌素释放肽 (GRP)。细胞对角蛋白和波形蛋白染色呈阳性，但对神经丝三联体蛋白呈阴性。
本库的细胞仅用于科研工作，未经许可不得用于其他目的，使用者不得将本库细胞转让给第三者。
培养备注
用无菌离心管收集瓶子培养基，留作过渡培养
细胞收到后处理：
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作，培养箱静置2-4小时。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液收集至离心管中，加入6ml完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。（注意发货的是密封培养瓶的话，放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松）
细胞培养步骤：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右完全培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。
