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人肺支气管鳞状细胞KNS-62
产品名称:
人肺支气管鳞状细胞KNS-62
英文名称:
型号:
YS3325C
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401
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产品详情


传代方法

第一次建议1:2传代 

冻存条件

细胞库无血清冻存液

细胞描述

该细胞系培养所用基础培养基为 DMEM/F12,配置完全培养基时需加入 10%FBS, 10ng/mL EGF,1%Anti-Anti

本库的细胞仅用于科研工作,未经许可不得用于其他目的,使用者不得将本库细胞转让给第三者。

培养备注

用无菌离心管收集瓶子培养基,留作过渡培养

 

培养瓶中细胞操作步骤

对于贴壁培养的细胞,寄送前,我们会将培养基充满整个培养瓶,以减少产品运输过程中贴壁细胞的脱落。

1. 收到细胞产品后,请注意观察是否有污染。将培养瓶置于倒置显微镜下仔细检查是否浑浊、是否细菌污染。因在运输过程中存在颠簸,且有些细胞对温度变化也很敏感,可能存在一些细胞脱落漂浮的情况,这些细胞仍是活细胞,请勿丢弃,可离心富集后传代使用。

2. 对于贴壁的细胞,在生物安全柜环境中,用真空泵去除培养瓶中的多余培养基,至剩余5-8mL左右,随后将细胞置于含有5%CO的37℃恒温 培养箱中培养,拧松瓶盖。如果细胞已经长满培养瓶请立即传代。

3. 对于悬浮的细胞,在生物安全柜环境中,转移培养瓶中的细胞至离心管中,离心200×g / 5 - 10 min,去除上清后,用5 mL培养基吹散细胞,转移至新的培养瓶中,随后置于含有5% CO 的37℃恒温培养箱中培养。

冻存细胞操作步骤

注意:为保存细胞的高存活率,请收到产品后,立即解冻培养。

1.将冻存管置于37℃ 水浴中来回晃动,迅速解冻。为避免污染,确保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速,大约2分钟。

2. 一旦冻存管中液体融化后,立即取出,采用 70%酒精喷拭冻存管表面。从此步开始,后续操作须在生物安全柜中完成。

3.将冻存管中的液体转移到含有5mL完全培养基的离心管中, 离心

4. 用完全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。为保证细胞复苏的存活率,请将培养基在37℃水浴预热后使用将细胞置于含有5%CO 的37℃恒温培养箱中培养。

贴壁细胞传代培养

1. 吸取并弃掉培养瓶中培养基,加入PBS清洗一次。

2. 加入 1.0 mL 0.25(w/v)Trypsin-0.53mM EDTA溶液,并置于37℃培养箱中孵育,直至细胞从壁上脱落分离。此过程大约需要3至5分钟(此处为12.5 cm2培养瓶所用体积,可根据实际情况增减用量)。

3. 加入2mL完全培养基中和胰蛋白酶,并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落,并使细胞分散。

4. 离心

5. 将细胞置于含有5%

传代比例:建议 1:2 (以培养瓶底面积计算)

培养基换液: 每隔 2 至 3 天。

联系我们

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