中国仓鼠卵巢细胞CHO-K1（悬浮）-上海雅吉生物科技有限公司

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T25	￥ 4800.00	1

CHO-K1 中国仓鼠卵巢细胞（悬浮）

培养说明书

细胞收货后处理

A、复苏细胞处理方法：培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是运输细胞的最好办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶，严格无菌后将细胞瓶放置培养箱中静置2-4小时以稳定细胞状态。静置后显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（最好40x,100x,200x各一张），前三天照片是重要售后依据，不提供照片默认收到状态良好。

B、冻存细胞处理方法：收到细胞后，观察泡沫箱中干冰是否有剩余，冻存管是否完好无损是否有解冻情况，若发现干冰完全汽化或冻存管有解冻破损现象，请及时拍照并与我们联系。如果细胞签收三天内未与我们联系，则默认为收货良好。复苏第一管如有活性问题，请及时联系我们，技术人员与您沟通指导后再复苏第二管，未与我方联系擅自复苏第二管出现问题不予售后。

细胞培养步骤

细胞传代：如果细胞密度超80%，即可进行传代培养，具体步骤如下：

方法A、

1) 离心收集细胞，1000 rpm条件下离心5-8min，弃去上清液，补加 1-2mL培养液后吹匀；

2) 将细胞悬液按 1:2 的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的T25培养瓶中或6cm培养皿中。（即1个T25瓶传代接种至2个T25瓶或者2个6cm的培养皿）

方法B、对于较难培养的细胞或新手，可离心收集细胞至T25瓶，按以下方法培养：

竖瓶子培养，完培只需要3-4ml培养，过48小时之后看状态，细胞密度没有起来的话，再往瓶子补加1ml的完培，继续过48小时之后看培养状态，密度起来的话，再往瓶子补加1ml的完培，继续过48小时之后看培养状态，这个时候应该密度高起来了，就可以收集液体离心1:2传代，每瓶竖着培养液也是3-4ml的完培培养。

C、细胞冻存：收集细胞悬液，1000rpm 条件下离心 5-8min，去除上清，按冻存数量（推荐每支冻存管5×10⁶左右细胞数量冻存），加入1ml的我司无血清冻存液（货号：C7001），轻轻混匀后，放-80℃冰箱，24小时后转入液氮罐中。