| 规格 | 价格 | 库存 |
|---|---|---|
| 50T | ¥ 1600 | 10 |
动物线粒体DNA纯化试剂盒(过柱法,PCR级)产品及特点 动物线粒体 DNA(mtDNA)是进行分子进化研究和母性遗传研究的重要材料,但传统的两步式动物 mtDNA 提取方法需要先温和裂解动物细胞,分离线粒体,然后再从线粒体中提取 mtDNA。此方法中的温和裂解细胞的条件十分难以控制,需要针对不同组织材料单独进行优化,因此纯化效果差异很大。本方法克服了上述缺点,
动物线粒体DNA纯化试剂盒(过柱法,PCR级)具有下列优点:
1. 不需要单独纯化线粒体,操作简单快捷。
2. 得到的动物 mtDNA 只能用于 PCR 分析,不能用于其它实验。
3. 可以用于培养的动物细胞,实体动物组织和血液。每 1E7 个动物细胞一般能得到100 ng 左右的 mtDNA,每克实体动物组织一般能得到 1-2 g mtDNA。
4. 本产品不能用于纯化植物线粒体 DNA(需要另购)。
5. 本试剂盒足够 50 次微量提取。
6. 本产品只可用于科研
动物线粒体DNA纯化试剂盒(过柱法,PCR级)使用方法 一、培养细胞的预先处理(本试剂盒不含相关试剂)
1. 用自备的 0.25%胰酶消化液处理约 1E7 个培养的动物细胞,离心收集后弃上清,保留细胞沉淀。
2. 用 PBS 缓冲液洗涤细胞沉淀两次,最后得到的细胞沉淀将直接用作动物 mtDNA 提取的材料。
二、动物组织细胞预处理(本试剂盒不含相关试剂)
3. 用剪刀将 1 g 新鲜的动物组织剪碎(芝麻大小最好),转移到 1.5 mL 塑料离心管中,直接用作动物 mtDNA 提取的材料。注意:不能使用冻存的动物组织,因为冻凝过程中形成的冰晶会将线粒体膜和细胞膜刺破,其 DNA 已经释放出来,被体液中的 DNA 酶降解。
三、血液预处理
4. 将 3-5 mL 抗凝外周血静置 30 分钟或低速离心 5 分钟,取白细胞层。
5. 用自备 PBS 缓冲液洗涤白细胞两次,得到的白细胞沉淀用于 mtDNA 提取。
四、线粒体粗提物制备
6. 用自选方法将 1E7 个培养细胞或 1 g 实体组织匀浆。
7. 室温 700×g 离心 6 分钟,收集上清。
8. 将上清在室温 10000×g 离心 10 分钟,得线粒体粗提物沉淀。
动物线粒体DNA纯化试剂盒(过柱法,PCR级)