1.工作液配制
(1)将所有组分恢复至室温。
(2)使用无菌水溶解 B 组分,配制成 2mg/mL 的储液,保存于避光样品管中。
(3)用 A 组分充分稀释 B 组分储液,配制成 0.2 mg/mL 的萤火虫萤光素酶工作液,涡旋震荡,确保充分混匀。
注:萤火虫萤光素酶工作液不能反复冻融,若单次实验用量较少,建议按单次使用量分装成小规格。在室温下,工作液配置3 h后,活性下降约 10%,5 h后,活性下降约 25%。
2.化学发光值检测
(1)提前从培养箱中拿出细胞培养板,室温孵育 20 min,使其恢复至室温 (22~25℃)。
(2)向培养板中加入与培养基等体积的萤火虫萤光素酶工作液,混匀。
(3)室温孵育 5 min。
注:孵育时间可随细胞类型和细胞数目适当调整。
3.用多功能酶标仪或化学发光仪读取数值。
注意事项:
1、使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2、萤火虫萤光素酶催化的生物发光的最强波长为 560 nm。请用化学发光 (Luminescence) 模块进行检测。
3、如果单管萤光测定仪测定,每个样品与测定试剂混合后到测定前的时间应保持一致。
4、本产品仅限于科研,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品和药品,不得存放于普通住宅内。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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