pCMV6-AC-GFP质粒载体（文献引用产品）-上海雅吉生物科技有限公司

规格	价格	库存
0.5ug质粒干粉	￥ 1380	11

规格

价格

库存

0.5ug质粒干粉

￥ 1380

一、扩增流程

收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。

1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）

①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；

②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）

③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；

④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）

⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；

（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）

⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。

二.质粒简介

pCMV6-AC-FC-S，如需质粒图谱序列，请向客服

文献参考：

上海细胞库