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仅供科研使用，不得用于诊断
人 T 淋巴细胞白血病病毒抗体检测试剂盒
（酶联免疫法）
1. 预期用途
本试剂盒用于检测血清、血浆等样本中的人 T 淋巴细胞白血病病毒抗体，仅供研究使用，不得用
于诊断。
2. 检测原理
试剂盒采用双抗原夹心法原理：将人 T 淋巴细胞白血病病毒抗原包被于酶标板上，加入样品，样
品中的抗体被捕获，结合形成“抗原-抗体”免疫复合物，清洗去除游离的杂质，再加入 HRP 标
记的酶标记的抗原，形成“抗原-抗体-酶标抗原”夹心复合物，清洗去除多余的酶标抗原，加入
TMB 显色，再加入终止液，用酶标仪在 450 nm 处测 OD 值，颜色的深浅和样品中的待测抗体的
浓度呈正比。
3. 包含的实验材料实验材料
名 称
Label
组成成分
Kit Components
数量（48T）
Quantity
数量（96T）
Quantity
酶标板
预包被酶标板
8×6 条
8×12 条
阳性对照
阳性对照
1 支×0.5mL
1 支×1mL
阴性对照
阴性对照
1 支×0.5mL
1 支×1mL
酶标记物
HRP 酶标记抗原
1 支×5mL
1 支×10mL
样品稀释液
PBS、BSA 等
1 支×5mL
1 支×10mL
浓缩洗液（20×）
20 倍浓缩洗液
1 支×15mL
1 支×25mL
显色剂
过氧化氢
1 支×6mL
1 支×10mL
终止液
稀硫酸、抗沉淀剂
1 支×3mL
1 支×6mL
如需单独采购通用型组分，请提供对应的组分名称。
4. 需要但未包含的实验材料
· 蒸馏水或去离子水，一次性离心管、一次性手套等耗材；
· 移液器、多通道移液器及配套枪头；
· 烧杯、量筒、试剂瓶等容器具；
· 用于封贴微孔板的封板膜或其他替代材料；
· 微孔板振荡器（如有需要）、离心机、旋涡振荡器等辅助设备；
· 恒温培养箱、恒温水浴箱、酶标仪、洗板机。www.yajimall.com
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5. 试剂的准备及储存
· 试剂盒各组分应储存于 2~8℃保存；
· 使用前请确保试剂盒按规定的条件储存，每次实验仅准备所需实验用量的试剂；
· 1×洗液的配制：浓缩洗液（20×）如有晶体析出，需在 37℃下加热至晶体全部溶解后使用。
用蒸馏水 1:20 稀释，例如：10mL 浓缩洗涤液加入 190mL 的蒸馏水，混合均匀。配制好的洗
液可以在室温保存 1 周；
6. 样品采集、预处理及储存
下面列出的样品收集和储存条件旨在作为一般性指导，不同类型样品的储存、使用稳定性尚
未完全评估。
· 血清：使用血清采集管采集全血，室温静置待血细胞凝集后取的血清，或直接在 1000×g 下离
心 15 分钟取得血清。操作应柔和，避免溶血发生。获取的血清应及时进行检测，如不能及时
进行检测，应等分为多份，储存在-20℃及以下温度条件，储存时间不超过 6 个月，冷冻储存
血清样品冻融不超过 2 次。
· 血浆：使用 EDTA 或肝素采血管收集血浆。全血采集后以 1000×g 离心 15 分钟取得血浆。操
作应柔和，避免溶血发生。获取的血浆应及时进行检测，如不能及时进行检测，应等分为多
份，储存在-20℃及以下温度条件，储存时间不超过 6 个月，冷冻储存血浆样品冻融不超过 2
次。
· 不能检测含叠氮钠、悬浮纤维蛋白或聚集物、重度溶血样品。
· 样品应无微生物污染。
7. 实验步骤
使用前将所有试剂置于室温平衡 30 分钟左右，也可置于 37℃温箱快速回温至室温。
注意：酶标板未恢复室温前，请勿开封。
1
合理安排阳性对照孔、阴性对照孔、空白孔、样品孔。
2
阳性对照孔加入阳性对照 100uL，阴性对照孔加入阴性对照 100uL。阴阳对照各设
置 3 孔。
3
样本孔先加入样品稀释液 80uL，再加入样本 20uL。
空白孔不加样品不加酶，其余操作与样品孔相同。
4
盖上封板膜，在 37℃下孵育 30 分钟。
5
洗板 5 次，最后一次洗板后弃去残留洗液，倒扣酶标板，在干净的吸水纸上拍干。
6
每孔加入酶标记物 100μL。
7
盖上封板膜，在 37℃下孵育 30 分钟。
8
洗板 5 次，最后一次洗板后弃去残留洗液，倒扣酶标板，在干净的吸水纸上拍干。
9
每孔加入显色剂 100uL。
10
37℃下避光孵育 15 分钟。
11
每孔加入终止液 50μL。
12
使用酶标仪在 450nm 检测波长及 620~690nm 参比波长条件下测定吸光度值，如果
没有参比波长则仅选择 450nm 波长进行检测。如果最高浓度校准品 OD 值过高，
应立即在 405/630nm 双波长条件下检测。www.yajimall.com
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8. 阳性判断值 Cut-Off
Cut-Off =阴性对照孔平均 OD 值×2.1（阴性对照孔 OD 均值小于 0.050 时，按 0.050 计算）。
例：阴性对照孔平均 OD 值为 0.100，则 Cut-OFF 值=0.100×2.1=0.210；
阴性对照孔平均 OD 值为 0.020，则 Cut-OFF 值=0.050×2.1=0.105。
9. 结果判断
阳性结果：样本 OD 值＞Cut-OFF 值，结果判为阳性；
阴性结果：样本 OD 值≤Cut-OFF 值，结果判为阴性；
10. 检测的局限性
样本浓度低于检出限时，检测结果无法进行准确判断。本试剂为定性试剂，不能作为定量试剂使
用。
11. 产品性能指标
以下结果基于校准品的浓度值实验得出，未纳入基质效应等其他因素的潜在影响。
检测 3 份企业阳性参考品，结果均为阳性。检测 3 份企业阴性参考品，结果均为阴性。
精密度：板内精密度 CV＜10%（N=20），板间精密度 CV＜15%（N=20）。
特异性（Analytical specificity）：其他相关因子在稀释缓冲液中制备为 10μg/mL 测定，没有观察
到明显的交叉反应。
12. 注意事项
· 试剂盒内所有成分仅供研究使用！
· 终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，应谨慎操作。
· 试剂盒成分含防腐剂、蛋白成分等，可能引起皮肤过敏反应，应佩带口罩避免吸入薄雾。
· 显色剂、浓缩洗液可能引起皮肤、眼睛和呼吸道刺激，应佩带口罩避免吸入薄雾。
· 佩戴防护手套、防护服、眼睛和面部防护用品，实验操作后彻底洗手。
13. 技术要点
· 不同批次的试剂盒不能混用，不建议将不同板上的微孔板条组装在一块板上检测，尽管是同
一批次试剂，也可能存在板与板之间的差异。
· 每次实验时应当始终配制标准曲线平行检测，不能将上一次的标准曲线用于下一次实验结果
的计算。
· 不要使用超过有效期的试剂盒进行检测。
· 底物显色剂应当为无色，如变蓝表明已变质，不能应用于实验。
· 使用适当的封板膜密封微孔板条，以便检测结果更加可靠。
· 操作时尽量避免产生气泡。不要将不同试剂瓶的瓶盖交叉使用。
· 应当遵循说明书的操作进行实验，不按照说明书的操作将导致实验结果的变化，任何不遵循
说明书的实验操作应当事先询问售后技术支持的建议。否则我们不保证实验结果的可靠。www.yajimall.com
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