产品编号:YS0521M
规格:100T / 1000T
中文名称:萤光素酶报告基因检测试剂盒
上海细胞库,中科院细胞库,武汉细胞库,协和细胞库,典藏中心细胞,杯状细胞,人肥大细胞,人食管癌细胞,人脐静脉内皮细胞,人前列腺癌细胞,人乳腺癌细胞,人神经母细胞,人胰腺癌细胞,人甲状腺细胞,人肺癌细胞,无血清细胞冻存液,人食管癌细胞,huvec细胞,人胃癌细胞
产品组成 | YS0521M-1 (100T) | YS0521M-2 (1000T) |
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Luciferase Reaction Buffer | 10mL | 100mL |
Luciferase Substrate (50x) | 200μL | 1mL×2 |
说明书 | 1份 | 1份 |
萤光素酶报告基因检测系统是一种辉光型定量检测试剂盒,具有高灵敏度和发光信号稳定的特点,符合高通量检测的需求。萤光素酶是一个经过基因工程改造的小分子酶(19.1kDa),是性能卓越的生物发光报告基因。它使用一种新型底物,可产生高强度、辉光型发光。信号强度是萤火虫以及海青萤光素酶的150倍;超强信号稳定性,半衰期可达2小时。萤光素酶的生物发光反应不依赖ATP,自发光背景低,光信号更亮,同时抑制背景发光以获得最高检测灵敏度。
反应原理原文:
新型底物 + O₂ → NANOUGHT Luciferase → 产物 → + CO₂ + Luminescence
(一)自备材料
PBS:多道排枪;白色不透光细胞培养板;化学发光仪或酶标仪。
(二)检测前准备
预先将Luciferase Reaction Buffer放置于室温融化。
取出Luciferase Substrate (50x),每次开盖前需进行短暂低速离心。
根据实际使用量,以50:1的比例将适量的Luciferase Reaction Buffer与Luciferase Substrate (50x)混匀,室温避光备用。例如:如果需要100ml反应液,则需要加入2ml的检测底物。
注:现配现用,剩余反应液舍弃。
(三)操作方法
细胞培养板放置5-15min恢复至室温(需白色不透光板)。
加入与培养液等体积的检测溶液(如96孔板加80-100μl)。
室温孵育5-10min(可振荡裂解)。
2小时内完成化学发光检测。
保存条件:-20℃保存,有效期1年。
注意事项:
使用不透明白色板减少孔间干扰。
同组样本需保持检测条件一致(温度、培养基等)。
检测前试剂和细胞板需平衡至室温。
多板检测时需控制孵育时间一致。
酶表达量过高会缩短信号半衰期,需优化转染量。
Luciferase Substrate (50x)为无水乙醇配制,挥发后可补足体积。
最强发光波长:460 nm。
上海细胞库,中科院细胞库,武汉细胞库,协和细胞库,典藏中心细胞,杯状细胞,人肥大细胞,人食管癌细胞,人脐静脉内皮细胞,人前列腺癌细胞,人乳腺癌细胞,人神经母细胞,人胰腺癌细胞,人甲状腺细胞,人肺癌细胞,无血清细胞冻存液,人食管癌细胞,huvec细胞,人胃癌细胞
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