一、背景

永生化人皮脂腺细胞是通过基因工程手段（如 hTERT（端粒酶逆转录酶） 或 SV40大T抗原、HPV E6/E7）使原代皮脂腺细胞获得无限增殖能力的细胞系。这类细胞解决了原代细胞增殖能力有限（通常仅能传代3-6代）的问题，为研究皮脂腺功能及相关疾病（如痤疮、皮脂腺炎）提供了稳定的体外模型。

• 技术发展：

  • 1999年，Zouboulis团队首次通过SV40大T抗原构建了 SZ95细胞系（源自德国人面部皮脂腺）。

  • 2024年，同济大学团队利用 hTERT 成功构建了 XL-i-20细胞系，这是首个基于亚洲人群的永生化皮脂腺细胞系。

  • 其他常见细胞系包括 SEB-1（HPV永生化）和 Seb-E6/E7（脂质合成活跃）。

• 应用需求：

  • 痤疮、脂溢性皮炎等疾病具有 人种特异性，需不同来源的细胞模型。

  • 永生化细胞能长期维持 皮脂分泌功能 和 雄激素响应性，适合药物筛选及机制研究。

二、细胞详情

1. 常见永生化皮脂腺细胞系

   细胞系	永生化方法	特点	应用领域
   SZ95	SV40大T抗原	保留脂质合成、雄激素受体表达	痤疮药物筛选、脂代谢研究7
   SEB-1	HPV E6/E7	高增殖能力，对炎症因子敏感	抗炎药物测试2
   XL-i-20	hTERT	亚洲来源，保持原代细胞特性	光动力疗法（ALA-PDT）研究

2. 关键生物学特性

   • 标志物表达：EMA（上皮膜抗原）、CK7（细胞角蛋白7）、ADRP（脂肪分化相关蛋白）。

   • 功能保留：

     • 脂质合成（油红O染色阳性）。

     • 对雄激素（如双氢睾酮）和维A酸类药物的响应。

   • 转录组特征：与炎症（TNF/MAPK通路）和脂代谢（PPARγ/SREBP-1）相关基因调控。

三、研究前景

1. 疾病机制研究

   • 痤疮：研究皮脂过度分泌、痤疮丙酸杆菌诱导的炎症反应。

   • 药物开发：

     • 控油成分（如石榴皮多酚通过TRPV1/AMPK通路抑制脂质合成）。

     • 抗炎药物（如黄芩苷抑制IL-6/IL-8释放）。

2. 新型模型构建

   • 3D类器官：模拟皮脂腺-毛囊微环境，用于ALA-PDT疗效评估。

   • CRISPR编辑：敲入痤疮相关基因（如IL-1α过表达）。

3. 转化医学应用

   • 个体化治疗：利用患者来源的iPSC分化为皮脂腺细胞。

   • 化妆品功效测试：评估控油、抗炎成分的安全性及有效性。

四、培养方法及注意事项

1. 培养基配方

   • 基础培养基：DMEM/F12 + 10% FBS。

   • 添加物：

     • 表皮生长因子（EGF，10-40 ng/mL）

     • 胰岛素（1-5 ng/mL）

     • 抗生素（青霉素/链霉素）。

2. 传代与冻存

   • 消化条件：0.25%胰蛋白酶，消化3-5分钟（避免过度消化导致分化能力丧失）。

   • 传代比例：1:2至1:4，80%汇合时操作。

   • 冻存液：含10% DMSO的FBS或无血清冻存液。

3. 关键注意事项

   • 分化能力维持：

     • 永生化细胞可能丧失部分原代细胞的分化特性，可通过 低血清培养 或 3D类器官 改善。

   • 污染控制：

     • 原代分离时需用两性霉素B预防真菌污染。

     • 定期检测支原体。

   • 功能验证：

     • 每10代检测一次标志物（如Vimentin、α-SMA）及脂质分泌功能。

五、总结

永生化人皮脂腺细胞是研究皮肤生理与疾病的 核心工具，其应用从基础机制拓展至药物研发。未来需进一步优化 培养体系（如类器官共培养）并开发 人种特异性模型（如XL-i-20），以推动精准医学进展