1. 产品概述
PANC-1/GEM细胞是基于人胰腺癌细胞系PANC-1构建的吉西他滨（Gemcitabine）耐药株，通过体外逐步增加药物浓度诱导获得。该细胞株广泛应用于胰腺癌耐药机制研究、化疗药物筛选及联合治疗策略开发，是探索胰腺导管腺癌（PDAC）治疗瓶颈的重要模型。
2. 鉴定与质量控制
- STR鉴定：经专业机构检测，细胞STR分型与标准数据库匹配，确保来源真实性。
- 支原体检测：支原体、细菌、真菌及酵母检测均为阴性，符合细胞实验无菌要求。
- 细胞特性：
- 形态：上皮细胞样，贴壁生长，部分细胞呈松散聚集状态。
- 来源：56岁白人男性胰腺导管癌组织，携带超三倍体核型（61-63条染色体）。
- 耐药浓度：最大耐受吉西他滨浓度为18 μg/mL（体外）或40-60 nM（体内）。
3. 操作步骤与注意事项
3.1 复苏与培养
- 复苏：
- 冻存管置于37℃水浴快速解冻，离心后重悬于不含GEM的完全培养基，接种至T25瓶或10cm皿，37℃静置2-3小时。
- 传代：
- 待细胞贴壁后，使用0.25%胰酶消化，离心后按1:2比例分瓶，初始培养基不含GEM，待细胞稳定（48-72小时）后逐步添加吉西他滨至目标浓度（如40-60 nM）。
- 冻存：
3.2 培养基配置
- 基础培养基：DMEM高糖（含1.5 g/L NaHCO₃），推荐GIBCO或iCell品牌。
- 添加剂：10%-15%胎牛血清（Gibco）、1%双抗、2 mM谷氨酰胺。
- 吉西他滨添加：最终浓度根据实验需求调整（如18 μg/mL或40-60 nM）。
3.3 注意事项
- 细胞脆弱期：复苏及传代初期需避免剧烈摇晃，换液时预热培养基。
- 耐药维持：若细胞生长缓慢，可暂时降低GEM浓度或切换至无药培养基恢复状态。
4. 研究意义
- 耐药机制解析：
- 揭示吉西他滨耐药相关通路，如UBR7-PRMT5轴调控糖酵解及免疫抑制微环境。
- 研究组蛋白修饰（如H3K27ac）和表观遗传调控对耐药的影响。
- 药物开发：
- 用于筛选逆转耐药的化合物（如PRMT5抑制剂DS-437）或联合用药方案（如PGG联合吉西他滨）。
- 临床转化：
- 模拟患者耐药肿瘤微环境，评估靶向治疗（如CDK4/6抑制剂）及免疫治疗的潜力。
5. 前景展望
- 精准治疗：通过该模型探索耐药标志物，指导临床个体化用药。
- 联合疗法：验证吉西他滨与天然小分子（如PGG）、免疫检查点抑制剂的协同效应。
- 临床前验证：支持新型药物（如溶瘤病毒、ADC药物）的体内药效评估及安全性测试。
6. 产品规格与技术支持
- 包装规格：T25培养瓶或1 mL冻存管（≥1×10⁶细胞）。
- 运输方式：干冰运输（冻存管）或复苏存活细胞常温运输。
- 技术支持：提供细胞培养视频、STR鉴定报告及耐药性验证实验方案。
总结
PANC-1/GEM细胞作为胰腺癌吉西他滨耐药研究的核心工具，为解析耐药机制、开发新型疗法及优化临床治疗策略提供了重要平台，具有显著的科研价值和转化潜力。
