产品分类/PRODUCT CLASSIFICATION
| 规格 | 价格 | 库存 |
|---|---|---|
| 50次 | ￥ 600 | 1 |
蛋白浓缩试剂盒
Protein Precipitation Kit
● 蛋白浓缩试剂盒内容及保存：
| 货号 | 产品名称 | 规格 | 贮存 |
| P3153-01 | 试剂 A-沉淀溶液 | 10 ml | RT |
| P3153-03 | 试剂 C-助沉剂 | 5 ml | RT |
| P3153-04 | 试剂 D-中和液 | 250 μl | RT |
| P3153-05 | 1 M NaCl | 1 ml | RT |
| P3153-06 | 1×SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液（变性，还原） | 1 ml | -20℃ |
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| 说明书 | 1份 |
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● 储存条件和效期：
试剂盒常温运输；收到后，按照标签温度贮存；本试剂盒有效期 1 年。
● 产品简介：
试剂盒原理：在酸性条件下蛋白质形成不溶性盐，使蛋白质变性导致构象发生改变，蛋白暴露出较 多的疏水性基团，蛋白发生聚集而沉淀。
为了避免酸对后续电泳的影响，沉淀的蛋白要使用丙酮等洗涤 液彻底清洗去除酸。
浓缩后的蛋白可以用于 SDS-PAGE 和 Western blot 前的蛋白样品处理。
以每次浓缩 800 μl 蛋白样品计算，本试剂盒可以使用40-45 次。
● 蛋白浓缩试剂盒操作方法：
1. 准备 1.5 ml 干净的离心管，加入 800 μl 蛋白样品溶液。
可选：如果样品溶液中离子强度低于 10 mM，补加 8 μl 的 1M NaCl 溶液。低于 800 μl 的样品，加 入 8 μl 1 M NaCl，用水补齐体积至 800 μl ，使 NaCl 终浓度为 10 mM。
2. 加入蛋白溶液 1/ 10 体积的试剂 C-助沉剂-80 μl ，混匀，常温静置 15 分钟。 注：加入试剂 C 后溶液变浑浊。
3. 加入步骤 2 溶液 1/4 体积的试剂 A -220 μl ，涡旋震荡 10-30 秒，使之充分混匀。
4. 冰浴放置 15 分钟。
5. 4℃ , 12000 rpm（13000 g）离心 10 分钟。 注：离心后白色蛋白沉淀弥散性可见于离心管管壁上。
6. 小心去掉上清液，保留沉淀。
注：请小心操作，可以用移液器辅助彻底吸弃上清。
7. 沉淀中加入 600 μl 预冷的丙酮（自备，试剂盒不提供），涡旋震荡 10-30 秒，彻底混匀。
注：丙酮有刺激性气味，请在通风橱内操作。
8. 冰浴 15 分钟。
注：本制品仅供科研用。请勿用于人体及动物的医疗、临床诊断或作为食品、化妆品、家庭用品的添加剂等用途。
9. 4℃ , 12000 rpm（13000 g) 离心 10 分钟；在通风橱中，倒掉上清。残留上清用 10 μl 吸头彻底吸弃， 沉淀物通风晾干 30-60 秒。注：沉淀不能过分干燥，否则将导致蛋白不好溶解。
10. 蛋白溶解：
根据下表选择溶解缓冲液：
| 下游实验 | 溶解缓冲液 |
| 备注 |
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SDS-PAGE 电泳 |
1×SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液（变性，还原） |
试剂盒提供 | 加入溶解缓冲液后， 彻底溶解沉淀（37℃ 温浴处理），溶液正 常颜色应为蓝色；如 果溶液为淡绿色或 黄色，加入 1/ 10 体 积中和液 D，使颜色 变回蓝色。 95℃ 处 理 5 分钟，电泳上样 |
| BCA 蛋白定量 | 40mM 碳酸钠 pH11.25 | 试剂盒不提供 | BCA 蛋白定量试剂 盒测定蛋白浓度 |
| 等电聚焦 IEF/2D 电泳 | 7M 尿素，2M 硫脲，40mM Tris，1%C7B2O 或 1% ASB-14 pH10.4 | 试剂盒不提供 |
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| 酶切实验 | 100 mM 碳酸氢铵 pH8.5 | 试剂盒不提供 |
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注：本制品仅供科研用。请勿用于人体及动物的医疗、临床诊断或作为食品、化妆品、家庭用品的添加剂等用途。
蛋白浓缩试剂盒
