HK-2细胞hFOXI1基因点突变细胞株-上海雅吉生物科技有限公司

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1×10^6cells/T25培养瓶	￥ 32000	1

一、产品详情

HK-2细胞hFOXI1基因点突变细胞株为HK-2细胞系（人肾皮质近曲小管上皮细胞）经过基因编辑技术引入hFOXI1基因点突变的细胞株。hFOXI1基因在肾脏发育和功能中起重要作用，该细胞株可用于研究hFOXI1基因突变对肾脏细胞功能、信号通路及疾病机制的影响。

传代方法

1:3-1:4，每2-3天换液一次

传代周期

24-48h

细胞描述

修饰基因：hFOXI1[NM_012188.5]_p.N161Y

基因ID：2299

转导方法：蛋白法

克隆类型：纯合子

细胞鉴定：PCR，测序

细胞冻存或复苏发货

本库的细胞仅用于科研工作，未经许可不得用于其他目的，使用者不得将本库细胞转让给第三者。

细胞备注

收到细胞后请务必仔细阅读产品资料，了解细胞相关信息，如贴壁特性 (贴壁/悬浮/半贴壁半悬浮)、细胞形态、培养体系、传代比例和换液频率等。

CRISPR/Cas9系统设计：
- 设计特异性sgRNA靶向hFOXI1基因目标位点。
- 合成同源定向修复模板（HDR模板），包含所需点突变及两侧同源臂。
细胞转染：
- 使用电穿孔或脂质体转染法将CRISPR/Cas9质粒和HDR模板导入HK-2细胞。
筛选与扩增：
- 通过抗生素筛选（如嘌呤霉素）获得稳定转染细胞。
- 单克隆分离并扩增阳性细胞株。

基因型鉴定：
- Sanger测序：验证hFOXI1基因目标位点是否成功引入点突变。
- T7E1酶切分析：检测基因编辑效率。
表型鉴定：
- Western Blot：检测hFOXI1蛋白表达水平及突变对蛋白功能的影响。
- qPCR：分析hFOXI1及其下游基因的mRNA表达变化。
功能验证：
- 细胞增殖实验：评估突变对细胞生长的影响。
- 迁移与侵袭实验：检测突变对细胞迁移和侵袭能力的影响。
- 离子转运功能实验：研究hFOXI1突变对HK-2细胞离子转运功能的影响。