规格 | 价格 | 库存 |
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传代方法 | 1:2-1:6,每2-3天换液一次 | 传代周期 | 48-72h |
细胞描述
| 细胞鉴定:PCR,测序 质量检测:细菌、真菌、支原体检测均为阴性 修饰类型:敲除 转导方法:蛋白法 抗性基因:— 克隆类型:纯合子 细胞冻存或复苏发货 本库的细胞仅用于科研工作,未经许可不得用于其他目的,使用者不得将本库细胞转让给第三者。 | ||
细胞备注 | 收到细胞后请务必仔细阅读产品资料,了解细胞相关信息,如贴壁特性 (贴壁/悬浮/半贴壁半悬浮)、细胞形态、培养体系、传代比例和换液频率等。 |
二、 产品优势
稳定表达,数据可靠: 目标基因稳定整合至基因组,避免外源基因丢失,确保蛋白表达稳定可靠,实验结果可重复性高。
背景清晰,干扰少: 经过严格的筛选和验证,确保细胞株背景清晰,内源性干扰因素少,实验结果更准确。
种类丰富,选择多样: 提供多种宿主细胞(如HEK293、CHO、HeLa等)和靶基因(如荧光蛋白、报告基因、功能基因等)组合,满足您不同的研究需求。
严格质检,品质保证: 每株细胞均经过严格的支原体检测、STR鉴定和功能验证,确保产品质量稳定可靠。
专业服务,全程支持: 可根据客户需求定制特定基因的稳转株,提供完善的售前咨询、售后技术支持和服务,为您的研究保驾护航。
基因功能研究: 过表达或敲低目标基因,研究其功能及调控机制。
药物筛选与评价: 构建药物靶点稳转细胞株,用于高通量药物筛选和药效评价。
蛋白表达与纯化: 高效表达目标蛋白,用于蛋白结构、功能研究和药物开发。
疾病模型构建: 构建疾病相关基因稳转细胞株,用于疾病机制研究和药物开发。
细胞培养:使用适当的培养基和条件培养宿主细胞,确保细胞处于最佳生长状态。
转染:将含有目标基因的载体通过转染试剂(如Lipofectamine)导入宿主细胞。根据载体类型选择合适的转染方法(如化学转染、电穿孔等)。
筛选:转染后24-48小时,加入筛选药物(如G418、Puromycin等)进行筛选。持续筛选2-3周,直至未转染细胞全部死亡。
单克隆筛选:将存活的细胞进行有限稀释,接种到96孔板中,培养至单克隆形成。挑选高表达目标蛋白的单克隆进行扩增。
验证:通过PCR、Western Blot等方法验证目标基因的整合和表达。检测目标蛋白的表达水平和功能活性。
冻存:将验证后的稳转株细胞进行冻存,建立细胞库。
载体信息:
载体类型: 质粒、慢病毒、逆转录病毒等。
筛选标记: G418、Puromycin、Hygromycin等。
启动子: CMV、EF1α、SV40等。
筛选药物浓度:
G418: 200-1000 μg/mL
Puromycin: 1-10 μg/mL
Hygromycin: 50-500 μg/mL
细胞状态: 确保细胞在转染前处于最佳生长状态,避免使用老化或污染的细胞。
转染效率: 不同细胞系的转染效率差异较大,需优化转染条件。
筛选药物: 筛选药物的浓度需根据细胞系和载体进行优化,避免过度筛选导致细胞死亡。
单克隆筛选: 单克隆筛选是获得高表达稳转株的关键步骤,需耐心细致操作。
冻存与复苏: 冻存和复苏过程中需严格控制温度和时间,避免细胞损伤。
四、 订购信息
雅吉生物产品全部优惠价供应,京津冀、江浙沪皖、川渝地区通常到货时间为次日达。其它主要大中城市到货时间为隔日达(周末和节假日除外)。
五、 联系我们
欢迎在线、电话、邮件(yajikit@163.com)、QQ或微信订购!订货热线:021-34661275或15317085058(微信同步)
六、 免责声明
产品仅用于科研用途,不得用于临床诊断或治疗。
七、 常见问题解答
Q1: 如何选择合适的稳转细胞株?
A1: 选择稳转细胞株需要考虑以下因素:
研究目的:明确您的研究目的,例如基因功能研究、药物筛选等。
宿主细胞:根据实验需求选择合适的宿主细胞,例如HEK293细胞适合蛋白表达,CHO细胞适合抗体生产。
靶基因:选择您感兴趣的靶基因,并确保其与宿主细胞兼容。
抗性标记:选择与您实验体系兼容的抗性标记,例如G418、Puromycin等。
Q2: 如何验证稳转细胞株的表达?
A2: 可以通过以下方法验证稳转细胞株的表达:
Western Blot:检测目标蛋白的表达水平。
qPCR:检测目标基因的mRNA表达水平。
荧光显微镜观察:如果目标蛋白带有荧光标记,可以直接观察荧光表达情况。
Q3: 稳转细胞株可以传代多少次?
A3: 稳转细胞株的传代次数取决于细胞类型、培养条件等因素。一般来说,稳转细胞株可以稳定传代20-30代。
[雅吉生物]致力于为您提供高质量的科研工具和服务,助力您的研究取得成功!