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B16-F10细胞mFgl2基因敲除株
产品名称:
B16-F10细胞mFgl2基因敲除株
产品编号:
YW-4051
产品类别:
基因敲除株
生长特性:
贴壁生长
培养体系:
DMEM-H+10%FBS+1%P/S
细胞形态:
上皮细胞样混有梭形细胞
[价格]
规格 价格 库存
1×10^6cells/T25培养瓶 ¥ 9800 1

产品详情

一 产品详情

 

传代方法

1:2-1:6,每2-3天换液一次

传代周期

48-72h

 

 

细胞描述

 

细胞鉴定:PCR,测序

质量检测:细菌、真菌、支原体检测均为阴性

修饰类型:敲除

转导方法:蛋白法

抗性基因:—

克隆类型:纯合子

细胞冻存或复苏发货

本库的细胞仅用于科研工作,未经许可不得用于其他目的,使用者不得将本库细胞转让给第三者。

细胞备注

收到细胞后请务必仔细阅读产品资料,了解细胞相关信息,如贴壁特性 (贴壁/悬浮/半贴壁半悬浮)、细胞形态、培养体系、传代比例和换液频率等。

 

二、 产品优势

  • 稳定表达,数据可靠: 目标基因稳定整合至基因组,避免外源基因丢失,确保蛋白表达稳定可靠,实验结果可重复性高。

  • 背景清晰,干扰少: 经过严格的筛选和验证,确保细胞株背景清晰,内源性干扰因素少,实验结果更准确。

  • 种类丰富,选择多样: 提供多种宿主细胞(如HEK293、CHO、HeLa等)和靶基因(如荧光蛋白、报告基因、功能基因等)组合,满足您不同的研究需求。

  • 严格质检,品质保证: 每株细胞均经过严格的支原体检测、STR鉴定和功能验证,确保产品质量稳定可靠。

  • 专业服务,全程支持: 可根据客户需求定制特定基因的稳转株,提供完善的售前咨询、售后技术支持和服务,为您的研究保驾护航。

  •  
  • 三、细胞株可广泛应用于以下研究领域:
  • 基因功能研究: 过表达或敲低目标基因,研究其功能及调控机制。

  • 药物筛选与评价: 构建药物靶点稳转细胞株,用于高通量药物筛选和药效评价。

  • 蛋白表达与纯化: 高效表达目标蛋白,用于蛋白结构、功能研究和药物开发。

  • 疾病模型构建: 构建疾病相关基因稳转细胞株,用于疾病机制研究和药物开发。

操作步骤

    1. 细胞培养:使用适当的培养基和条件培养宿主细胞,确保细胞处于最佳生长状态。

    2. 转染:将含有目标基因的载体通过转染试剂(如Lipofectamine)导入宿主细胞。根据载体类型选择合适的转染方法(如化学转染、电穿孔等)。

    3. 筛选:转染后24-48小时,加入筛选药物(如G418、Puromycin等)进行筛选。持续筛选2-3周,直至未转染细胞全部死亡。

    4. 单克隆筛选:将存活的细胞进行有限稀释,接种到96孔板中,培养至单克隆形成。挑选高表达目标蛋白的单克隆进行扩增。

    5. 验证:通过PCR、Western Blot等方法验证目标基因的整合和表达。检测目标蛋白的表达水平和功能活性。

    6. 冻存:将验证后的稳转株细胞进行冻存,建立细胞库。

  • 载体信息:

    • 载体类型: 质粒、慢病毒、逆转录病毒等。

    • 筛选标记: G418、Puromycin、Hygromycin等。

    • 启动子: CMV、EF1α、SV40等。

  • 筛选药物浓度:

    • G418: 200-1000 μg/mL

    • Puromycin: 1-10 μg/mL

    • Hygromycin: 50-500 μg/mL

注意事项

    1. 细胞状态: 确保细胞在转染前处于最佳生长状态,避免使用老化或污染的细胞。

    2. 转染效率: 不同细胞系的转染效率差异较大,需优化转染条件。

    3. 筛选药物: 筛选药物的浓度需根据细胞系和载体进行优化,避免过度筛选导致细胞死亡。

    4. 单克隆筛选: 单克隆筛选是获得高表达稳转株的关键步骤,需耐心细致操作。

    5. 冻存与复苏: 冻存和复苏过程中需严格控制温度和时间,避免细胞损伤。

四、 订购信息

雅吉生物产品全部优惠价供应,京津冀、江浙沪皖、川渝地区通常到货时间为次日达。其它主要大中城市到货时间为隔日达(周末和节假日除外)。

 

五、 联系我们

欢迎在线、电话、邮件(yajikit@163.com)、QQ或微信订购!订货热线:021-34661275或15317085058(微信同步)

 

六、 免责声明

产品仅用于科研用途,不得用于临床诊断或治疗。

七、 常见问题解答

Q1: 如何选择合适的稳转细胞株?

A1: 选择稳转细胞株需要考虑以下因素:

  • 研究目的:明确您的研究目的,例如基因功能研究、药物筛选等。

  • 宿主细胞:根据实验需求选择合适的宿主细胞,例如HEK293细胞适合蛋白表达,CHO细胞适合抗体生产。

  • 靶基因:选择您感兴趣的靶基因,并确保其与宿主细胞兼容。

  • 抗性标记:选择与您实验体系兼容的抗性标记,例如G418、Puromycin等。

Q2: 如何验证稳转细胞株的表达?

A2: 可以通过以下方法验证稳转细胞株的表达:

  • Western Blot:检测目标蛋白的表达水平。

  • qPCR:检测目标基因的mRNA表达水平。

  • 荧光显微镜观察:如果目标蛋白带有荧光标记,可以直接观察荧光表达情况。

Q3: 稳转细胞株可以传代多少次?

A3: 稳转细胞株的传代次数取决于细胞类型、培养条件等因素。一般来说,稳转细胞株可以稳定传代20-30代。

[雅吉生物]致力于为您提供高质量的科研工具和服务,助力您的研究取得成功!

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