首页 > 上海细胞库 > 稳转细胞系
Hep 3B细胞human KLF4基因敲除株
产品名称:
Hep 3B细胞human KLF4基因敲除株
产品编号:
YW-3608
产品类别:
稳转细胞系
生长特性:
贴壁生长
培养体系:
EMEM+10%FBS+1%P/S
传代方法:
1:2-1:3,每2-3天换液一次
细胞形态:
上皮细胞样
[价格]
规格 价格 库存
1×10^6cells/T25培养瓶 ¥ 17800 1

产品详情

修饰基因:hKLF4

修饰类型:敲除

转导方法:质粒电转

抗性基因:Puro

克隆类型:纯合子

细胞鉴定:PCR,测序

 

细胞接收后处理方法

冻存管运输方式


1.请在收到细胞后,先检查包装是否完整,干冰是否充足,冻存管有无破损等情况,并核对细胞管上的标签信息,细胞管数是否与发货清单一致。如有异常情况,请及时与我们联系。


2.收到细胞后如不立即进行实验,则请将细胞放至-80℃或液氮中保存。


3. 实验前开启水浴锅并预热培养基,并备好15mL离心管加入5mL预热后的培养基。


4.将冻存管置于37℃水浴锅内,快速摇动解冻直到内容物融化,同时需注意避免水面没过管口。


5.将冻存管外壁进行常规消毒后,在超净台内小心开盖,尽量避免气泡溢出,轻柔吹打数次,转移至15mL离心管内。使用1 mL培养基清洗冻存管内壁,一并收集至15mL离心管内。


6. 250g离心5min,收集细胞沉淀,弃掉上清并加入2mL完全培养基重悬。


7.取20μL细胞悬液至EP管,台盼蓝染色并计数,记录细胞数量和存活率。如有异常请及时与我们联系,如无台盼蓝,可略过该步骤。


8. 将重悬后的细胞接种至合适大小的培养器皿中,放置于培养箱内进行培养。


9. 24h后镜下拍照并反馈我们,换液后继续培养。


培养瓶(贴壁细胞)运输方式:


1. 请在收到细胞后,先检查包装是否完整,有无破损漏液的情况,并核对细胞瓶上的标签信息,细胞瓶数是否与发货清单一致。如有异常情况,请及时与我们联系。


2. 观察瓶内的培养基是否澄清,镜下观察细胞是否状态良好,并将细胞容器外壁进行常规消毒后,置于培养箱内放置2-3h,让脱壁的细胞可以重新贴附。


2.小心开盖移去瓶内的培养基,更换为细胞专用的完全培养基,按照培养器皿决定用量。若细胞脱壁过多,可将原培养基离心获得细胞沉淀,再接种回原瓶内。


2.镜下拍照并反馈我们,如细胞汇合度较低,则放置于培养箱内进行培养。如细胞汇合度达到80%以上,则可按照常规方法进行消化传代。


3.运输方式:培养瓶(悬浮细胞)


1. 请在收到细胞后,先检查包装是否完整,有无破损漏液的情况,并核对细胞瓶上的标签信息,细胞瓶数是否与发货清单一致。如有异常情况,请及时与我们联系。


2. 观察瓶内的培养基是否澄清,镜下观察细胞是否状态良好,拍照并反馈我们。


3.将细胞容器外壁进行常规消毒后,置于超净工作台内小心开盖。将瓶内的培养基全部转移至若干50 mL离心管内,并清洗培养瓶内壁一并收集。


4. 250g离心5min收集细胞沉淀,弃掉上清,使用新鲜的完全培养基重悬至合适密度。接种至合适的培养器皿中,置于培养箱内培养。


5. 培养24h后观察细胞状态和密度,按照常规方法进行传代。


4.运输方式:血清管


1. 请在收到细胞后,先检查包装是否完整,有无破损漏液的情况,并核对细胞管上的标签信息,细胞管数是否与发货清单一致。如有异常情况,请及时与我们联系。


2. 收到细胞后请尽快进行实验,如不能及时处理,请将细胞放至常温环境,通常15-25℃为佳,并尽量在24h内完成实验。否则细胞状态和存活率将会受到一定的影响。


3. 血清管悬液可能会呈现一定程度的浑浊状态,这属于正常现象,请放心操作。


4. 将血清管外壁进行常规消毒后,在超净台内小心开盖,尽量避免气泡溢出,轻柔吹打数次,转移至15mL离心管内。


5. 吸取1mL 培养基清洗血清管内壁,同样转移至15mL管,并吹打均匀。


6. 取20μL细胞悬液至EP管,台盼蓝染色并计数,记录细胞数量和存活率。如有异常请及时与我们联系,如无台盼蓝,可略过该步骤。


7. 250g离心5min,收集细胞沉淀,并接种至合适大小的培养器皿中,放置于培养箱内进行培养。


8. 24h后镜下拍照并反馈我们,并根据汇合度继续培养或消化传代。

 

5.运输方式:


1.Hep 3B细胞human KLF4基因敲除株冻存管和Buffer共2个试剂管。请在收到细胞后,先检查真空包装袋内的“细胞胶囊”管身是否完好,培养液是否外渗,并核对管身上的标签信息,细胞管数是否与发货清单一致。如有异常情况,请及时与我们联系。


2.   收到Hep 3B细胞human KLF4基因敲除株后请尽快进行实验,如不能及时处理,请将细胞放至常温环境,通常15-25℃为佳,并尽量在24 h内完成实验,否则细胞状态和存活率将会受到一定的影响。“细胞胶囊”管内的培养液可能会呈现一定程度的浑浊状态,这属于正常现象,请放心操作。


3.用75%酒精消毒包装袋表面,在超净台内取出细胞胶囊管和Buffer管,小心的打开细胞胶囊管盖,尽量避免气泡溢出。


4. 使用移液枪将细胞胶囊管中的培养液全部弃去。


5. 将Buffer全部加入到细胞胶囊管中,拧紧管盖,上下颠倒3-5 min。


6. 观察到细胞胶囊完全溶解后,小心开盖,使用移液枪轻柔吹打数次,转移到15 mL离心管内。


7.取20μL细胞悬液至EP管,台盼蓝染色并计数,记录细胞数量和存活率。如有异常请及时与我们联系。


8. 250 g离心4 min,收集细胞沉淀,并接种到合适大小的培养器皿中,放置于培养箱内进行培养。


 

9. 24 h 后显微镜下观察细胞状态,观察细胞时请拍100×、200×各2-3张照片进行留存,所拍照片应尽量清晰,并根据汇合度继续培养或消化传代。

联系我们

TEL:021-34661275  点击拨打热线