规格 | 价格 | 库存 |
---|---|---|
1×10^6cells/T25培养瓶 | ¥ 15000 | 1 |
基因敲除目标:GPI(葡萄糖-6-磷酸异构酶)
应用领域:癌症研究、代谢研究、免疫学研究、药物筛选
THP-1细胞:
THP-1细胞是一种人单核细胞白血病细胞系,来源于一位急性单核细胞白血病患者的血液。该细胞系具有单核细胞/巨噬细胞的特征,广泛用于免疫学、癌症研究和炎症反应的研究。THP-1细胞可以通过诱导剂(如PMA)分化为巨噬细胞样细胞,常用于研究单核细胞/巨噬细胞的功能和信号通路。
GPI基因:
GPI(Glucose-6-Phosphate Isomerase,葡萄糖-6-磷酸异构酶)是一种关键的代谢酶,参与糖酵解和糖异生途径。GPI催化葡萄糖-6-磷酸(G6P)和果糖-6-磷酸(F6P)之间的相互转化。除了其代谢功能外,GPI还被发现具有细胞因子样活性,能够促进细胞增殖、迁移和血管生成,与多种癌症的发生和发展密切相关。
修饰基因:GPI
修饰类型:敲除
转导方法:蛋白电转
抗性基因:—
克隆类型:纯合子
细胞鉴定:PCR,测序
基因敲除验证:通过CRISPR/Cas9技术精确敲除GPI基因,确保基因功能的完全丧失。敲除效果通过测序和Western Blot验证。
代谢表型研究:GPI基因敲除后,THP-1细胞的糖酵解和糖异生途径受到影响,适合研究代谢重编程与细胞功能的关系。
癌症研究模型:GPI在多种癌症中高表达,敲除GPI基因的THP-1细胞可用于研究GPI在癌症发生、发展中的作用。
药物筛选平台:该细胞株可用于筛选针对GPI相关代谢途径的抗癌药物或免疫调节药物。
基因敲除验证:
测序结果:GPI基因的编码区出现移码突变,导致蛋白翻译提前终止。
Western Blot:GPI蛋白在敲除细胞中完全缺失。
代谢表型分析:
糖酵解速率:GPI敲除后,THP-1细胞的糖酵解速率显著降低,乳酸产量减少。
ATP水平:GPI敲除细胞的ATP生成减少,表明其能量代谢受到抑制。
细胞增殖与凋亡:
增殖速率:GPI敲除细胞的增殖速率显著降低,表明GPI在细胞生长中起重要作用。
凋亡率:GPI敲除细胞的凋亡率增加,提示GPI可能具有抗凋亡功能。
药物敏感性:
化疗药物:GPI敲除细胞对某些化疗药物(如阿霉素)的敏感性增加,提示GPI可能与药物耐药性相关。
代谢抑制剂:GPI敲除细胞对糖酵解抑制剂的敏感性增加,适合用于代谢相关药物的筛选。
癌症代谢研究:研究GPI在癌细胞代谢重编程中的作用,探索其作为癌症治疗靶点的潜力。
免疫调节研究:GPI在免疫细胞中的功能研究,特别是其在巨噬细胞极化和炎症反应中的作用。
药物筛选:利用GPI敲除细胞筛选针对代谢途径的抗癌药物或免疫调节药物。
运输条件:干冰运输
保质期:1年
细胞复苏后建议在培养箱中静置24小时,以确保细胞状态稳定。
建议定期检测细胞的基因敲除状态,避免基因回复突变。
本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或治疗。