上海细胞库
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AKR-GFP-Puro稳转细胞株是通过将GFP（绿色荧光蛋白）和Puro（嘌呤霉素抗性基因）稳定整合到AKR细胞基因组中而构建的细胞株。该细胞株能够在嘌呤霉素选择压力下稳定表达GFP，适用于荧光成像、细胞追踪、药物筛选等多种实验研究。
细胞名称: AKR-GFP-Puro稳转细胞株
细胞来源: AKR细胞系（小鼠白血病细胞）
细胞特性: 该细胞株具有稳定的GFP表达和嘌呤霉素抗性，适用于长期实验研究。
STR鉴定: 经过STR（短串联重复序列）鉴定，确认细胞株身份正确，无交叉污染。
高表达GFP: 细胞株内GFP表达水平高，便于荧光显微镜观察和流式细胞术分析。
稳定遗传: GFP和Puro基因稳定整合到细胞基因组中，确保长期实验中的稳定性。
抗性筛选: 具有嘌呤霉素抗性，便于筛选和维持纯化的细胞群体。
从液氮罐中取出冻存的AKR-GFP-Puro细胞，迅速放入37°C水浴中解冻。
解冻后，将细胞悬液转移到15 mL离心管中，加入5 mL预热的完全培养基（含10% FBS）。1000 rpm离心5分钟，弃上清，用新鲜完全培养基重悬细胞。
将细胞接种到T25培养瓶中，置于37°C、5% CO2培养箱中培养。
当细胞密度达到80-90%时，进行传代。
弃去旧培养基，用PBS洗涤细胞一次。
加入1 mL 0.25%胰酶-EDTA，37°C消化1-2分钟。
加入5 mL完全培养基终止消化，轻轻吹打细胞至单细胞悬液。
按1:3至1:5的比例将细胞接种到新的培养瓶中。
在细胞复苏或传代后，加入2 μg/mL嘌呤霉素进行筛选。
每隔2-3天更换一次含嘌呤霉素的培养基，持续筛选1-2周。
筛选结束后，继续使用含1 μg/mL嘌呤霉素的培养基维持培养。
使用荧光显微镜观察GFP表达情况，激发波长488 nm，发射波长507 nm。
使用流式细胞术定量分析GFP阳性细胞比例。
细胞冻存: 使用90% FBS和10% DMSO作为冻存液，细胞密度为1-2×10^6 cells/mL，冻存于液氮中。
细胞污染: 定期检查细胞是否有微生物污染，确保实验结果的可靠性。
培养基更换: 每隔2-3天更换一次培养基，保持细胞良好的生长状态。
荧光成像: 用于活细胞荧光成像和细胞追踪。
药物筛选: 用于高通量药物筛选和毒性测试。
基因功能研究: 用于基因过表达或敲除研究中的荧光标记。
储存条件: 液氮保存
运输条件: 干冰运输
如有任何技术问题或需要进一步的实验指导，请联系我们的技术支持团队。
