产品分类/PRODUCT CLASSIFICATION
| 规格 | 价格 | 库存 |
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产品描述:
A20-LUC-GFP-Puro 细胞系是通过慢病毒转染技术，将荧光素酶 (Luciferase, LUC) 和绿色荧光蛋白 (Green Fluorescent Protein, GFP) 基因稳定整合到小鼠B细胞淋巴瘤细胞系 A20 中构建而成。该细胞系可用于体内外肿瘤生长、转移、药物筛选等研究。
产品特点:
双标记: 同时表达 LUC 和 GFP，便于体内外荧光成像和生物发光成像。
稳定表达: LUC 和 GFP 基因稳定整合到基因组中，表达稳定。
抗生素筛选: 带有 Puromycin 抗性基因，方便使用 Puromycin 进行筛选和维持。
高增殖能力: 保留 A20 细胞系的高增殖能力，适合大规模实验。
应用领域:
肿瘤研究: 可用于研究肿瘤生长、转移、血管生成、免疫治疗等。
药物筛选: 可用于筛选抗肿瘤药物，评估药物疗效和毒性。
分子机制研究: 可用于研究肿瘤发生发展的分子机制。
A20-LUC-GFP-Puro实验步骤:
1. 细胞复苏:
从液氮罐中取出冻存的 A20-LUC-GFP-Puro 细胞，迅速放入 37℃ 水浴中解冻。
将细胞悬液转移至 15 mL 离心管中，加入 10 mL 预热的完全培养基 (RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S)。
1000 rpm 离心 5 分钟，弃上清。
用 10 mL 完全培养基重悬细胞，接种至 T25 培养瓶中，置于 37℃、5% CO2 培养箱中培养。
2. 细胞传代:
当细胞密度达到 80%-90% 时，进行传代。
弃去培养上清，加入 2 mL PBS 洗涤细胞一次。
加入 1 mL 0.25% 胰酶 (含 EDTA)，置于 37℃ 培养箱中消化 1-2 分钟。
加入 5 mL 完全培养基终止消化，轻轻吹打细胞至完全分散。
将细胞悬液转移至 15 mL 离心管中，1000 rpm 离心 5 分钟，弃上清。
用 10 mL 完全培养基重悬细胞，按 1:3 至 1:5 的比例接种至新的培养瓶中。
3. 细胞冻存:
选择处于对数生长期的细胞进行冻存。
按照细胞传代的方法收集细胞，1000 rpm 离心 5 分钟，弃上清。
用冻存液 (90% FBS + 10% DMSO) 重悬细胞，调整细胞密度至 1×10^6 ~ 1×10^7 cells/mL。
将细胞悬液分装至冻存管中，每管 1 mL。
将冻存管放入程序降温盒中，置于 -80℃ 冰箱过夜，然后转移至液氮罐中长期保存。
4. 荧光成像:
将细胞接种至 96 孔板或 35 mm 培养皿中，置于 37℃、5% CO2 培养箱中培养。
待细胞贴壁后，使用荧光显微镜观察 GFP 荧光信号。
5. 生物发光成像:
将细胞接种至 96 孔板或 35 mm 培养皿中，置于 37℃、5% CO2 培养箱中培养。
待细胞贴壁后，加入 D-luciferin (终浓度 150 μg/mL)，使用生物发光成像仪检测 LUC 荧光信号。
注意事项:
本产品仅用于科研用途，不得用于临床诊断或治疗。
操作细胞时，请注意无菌操作，避免污染。
细胞冻存和复苏过程中，请严格控制温度和时间，以保证细胞活力。
