上海细胞库
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BaF3-FLT3-ITD稳转细胞株
BaF3-FLT3-ITD稳转细胞株是通过将FLT3基因内部串联重复突变（Internal Tandem Duplication, ITD）稳定转染至BaF3细胞中构建的细胞模型。FLT3-ITD突变常见于急性髓系白血病（AML），该细胞株是研究FLT3-ITD信号通路、药物筛选及抗肿瘤药物开发的理想工具。
高稳定性：FLT3-ITD基因在BaF3细胞中稳定表达，确保实验结果的可靠性和重复性。
高灵敏度：对FLT3-ITD抑制剂（如索拉非尼、米多妥林等）具有高度敏感性，适用于药物筛选和药效评估。
疾病模型：模拟FLT3-ITD突变相关的白血病病理特征，适用于肿瘤机制研究和药物开发。
广泛应用：可用于FLT3-ITD信号通路研究、抗肿瘤药物筛选及分子生物学实验。
细胞类型：BaF3细胞（小鼠前B细胞）
转染基因：FLT3-ITD（内部串联重复突变）
培养基：RPMI 1640 + 10% FBS + 1% Penicillin-Streptomycin
储存条件：液氮或-80°C保存
包装规格：1 x 10^6 cells/vial
从液氮或-80°C中取出冻存的BaF3-FLT3-ITD细胞株，迅速放入37°C水浴中解冻。
将解冻后的细胞悬液转移至15 mL离心管中，加入5 mL预热的完全培养基（RPMI 1640 + 10% FBS）。
轻轻混匀后，以1000 rpm离心5分钟，弃去上清。
用适量完全培养基重悬细胞，转移至培养瓶中，置于37°C、5% CO2的培养箱中培养。
每隔2-3天观察细胞状态，当细胞密度达到80-90%时进行传代。
传代时，将细胞悬液转移至离心管中，以1000 rpm离心5分钟，弃去上清。
用新鲜完全培养基重悬细胞，按1:3至1:5的比例分装至新的培养瓶中，继续培养。
收集对数生长期的细胞，以1000 rpm离心5分钟，弃去上清。
用冻存液（90% FBS + 10% DMSO）重悬细胞，调整细胞密度至1-5 x 10^6 cells/mL。
将细胞悬液分装至冻存管中，标记细胞名称、日期及批次。
采用程序降温法（如-80°C过夜后转移至液氮）或直接放入液氮中长期保存。
药物筛选：将细胞接种于96孔板中，加入不同浓度的FLT3-ITD抑制剂，培养48-72小时后检测细胞活力。
信号通路研究：通过Western Blot、qPCR等技术检测FLT3-ITD下游信号通路的变化。
肿瘤机制研究：利用该细胞株研究FLT3-ITD突变在白血病发生和发展中的作用。
解冻细胞时动作要迅速，避免反复冻融导致细胞损伤。
复苏后的细胞需在培养箱中静置24小时，避免频繁移动。
定期更换培养基，保持细胞良好的生长状态。
所有操作需在无菌条件下进行，避免细胞污染。
使用无菌的培养基、离心管和培养瓶，操作前用75%乙醇消毒工作台。
避免细胞过度生长，及时传代以保持细胞活性。
传代时注意轻柔操作，避免机械损伤细胞。
冻存时使用适量的冻存液，避免细胞损伤。
冻存细胞需标记清晰，避免混淆。
复苏后若细胞活力低于80%，需重新复苏新的细胞株。
定期检测FLT3-ITD基因的表达水平，确保细胞株的稳定性。
定期进行无菌检测，确保细胞无微生物污染。
