上海细胞库
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BaF3-FLT3稳转细胞株是通过将FLT3基因稳定转染至BaF3细胞中构建的细胞模型。FLT3是一种重要的受体酪氨酸激酶，与多种血液系统恶性肿瘤（如急性髓系白血病）的发生和发展密切相关。该细胞株广泛应用于FLT3信号通路研究、药物筛选、抗肿瘤药物开发及分子生物学研究。
稳定表达FLT3：FLT3基因在BaF3细胞中稳定表达，确保实验结果的可靠性和重复性。
高灵敏度：对FLT3抑制剂具有高度敏感性，适合用于药物筛选和药效评估。
应用广泛：适用于FLT3相关信号通路研究、抗肿瘤药物开发及分子机制研究。
易于培养：BaF3细胞为悬浮细胞，培养条件简单，易于操作。
细胞类型：BaF3细胞（小鼠前B细胞）
转染基因：FLT3（人源或鼠源）
培养基：RPMI 1640 + 10% FBS + 1% Penicillin-Streptomycin
储存条件：液氮或-80°C长期保存
包装规格：1 x 10^6 cells/vial
从液氮或-80°C中取出冻存的BaF3-FLT3细胞，迅速放入37°C水浴中解冻（1-2分钟）。
将解冻的细胞悬液转移至15 mL离心管中，缓慢加入5 mL预热的完全培养基（RPMI 1640 + 10% FBS）。
轻轻混匀后，以1000 rpm离心5分钟，弃去上清。
用适量完全培养基重悬细胞，转移至培养瓶或培养皿中。
置于37°C、5% CO2的培养箱中培养。
每隔2-3天观察细胞状态，当细胞密度达到80-90%时进行传代。
轻轻吹打细胞悬液，取适量细胞悬液转移至新的培养瓶中，加入新鲜完全培养基（传代比例通常为1:3至1:5）。
继续置于37°C、5% CO2的培养箱中培养。
收集对数生长期的细胞，以1000 rpm离心5分钟，弃去上清。
用冻存液（90% FBS + 10% DMSO）重悬细胞，调整细胞密度至1-5 x 10^6 cells/mL。
将细胞悬液分装至冻存管中，标记细胞名称、日期及批次。
将冻存管放入程序降温盒中，置于-80°C冰箱过夜，随后转移至液氮中长期保存。
药物筛选：将细胞接种于96孔板中，加入不同浓度的FLT3抑制剂，通过MTT或CCK-8法检测细胞活力。
信号通路研究：通过Western Blot、qPCR等技术检测FLT3下游信号通路的变化。
抗肿瘤药物开发：评估药物对FLT3突变细胞的抑制作用。
解冻过程需迅速，避免细胞损伤。
解冻后立即用完全培养基稀释，减少DMSO对细胞的毒性。
保持无菌操作，避免细胞污染。
定期更换培养基，保持细胞良好的生长状态。
避免细胞过度生长，及时传代。
冻存液中DMSO的终浓度不宜超过10%。
冻存细胞需使用程序降温盒，避免细胞冰晶损伤。
冻存后需记录细胞名称、日期及批次，便于后续使用。
实验前需检测细胞的FLT3表达水平，确保细胞株的稳定性。
药物筛选时需设置阴性对照和阳性对照，确保实验结果的可靠性。
