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人真皮淋巴上皮细胞
产品名称:
人真皮淋巴上皮细胞
产品编号:
P24471
产品类别:
原代细胞
生长特性:
贴壁生长
培养体系:
专用培养基
传代方法:
可传2-3代
细胞形态:
上皮细胞样
[价格]
规格 价格 库存
5×105cells ¥ 5000 10

产品详情

 

  1. 细胞简介:

    人真皮淋巴上皮细胞分离自真皮组织;真皮,位于表皮深层,向下与皮下组织相连,真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起,埋于基质内。其内分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维,使皮肤既有弹性,又有韧性。其由两层组成——乳头层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋白、弹性纤维以及基质。微血管内皮细胞(MEC)在炎症反应、肿瘤生长、创面愈合过程中起着非常重要的作用。在创面愈合研究领域,由于表皮细胞、真皮成纤维细胞体外培养技术的成熟,人们对这两种细胞早已进行了大量深入的研究。

  2. 方法简介:

    实验室分离的人真皮淋巴上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

  3. 质量检测:

    实验室分离的人真皮淋巴上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

  4. 培养信息:

    包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
    培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
    产品货号 P24471
    换液频率 每2-3天换液一次
    生长特性 贴壁
    细胞形态 上皮细胞样
    传代特性 可传2-3代
    消化液 0.25%胰蛋白酶
    培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%

    人真皮淋巴上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

    发货时发送细胞电子版照片

    三、使用方法

    人外周血淋巴细胞是一种悬浮细胞,细胞形态呈圆形,在技术部标准操作流程下,细胞不增殖;不传代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。

    客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

    1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。

    2. 悬浮细胞处理

    1)收集T25细胞培养瓶中的培养基至50mL离心管中,用PBS清洗细胞培养瓶1-2次,收集清洗液;

    2)1200-1500rpm离心3min,弃上清,收集细胞沉淀;

    3)加入5mL新鲜完全培养基,用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞;将分散好的细胞调整合适密度接种至培养器皿中,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;

    4)若遇到悬浮细胞团块较大,无法机械吹散时,向步骤2)中细胞沉淀添加0.25%胰蛋白酶消化液2mL至离心管中,用吸-管轻轻吹打混匀,37℃温浴2-3min,消化结束后,加入胰

    酶抑制剂(或血清)终止消化,用吸管轻轻吹打,分散细胞;1200rpm离心5min,弃上清,

    收集细胞沉淀;

    5)加入5mL新鲜完全培养基,用吸管轻轻吹打混匀;按传代比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;

    6)待细胞状态稳定后,培养观察,用于实验;之后再按照换液频率更换新鲜的完全培养基。

    四、注意事项

    1. 培养基于4℃条件下可保存3个月。

    2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。

    3. 消化过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

    4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

    5. 该细胞只可用于科研。

    特殊注意事项

    6. 此细胞为悬浮细胞,请注意不要直接倒掉,造成损失;悬浮细胞因多数胞体较小,离心收集时,请注意悬液中细胞是否收集完全,可适当加大离心转速200转或增加离心时间3-5min,增加细胞获取量。

    备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考

 

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