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小鼠退行性椎间盘髓核细胞
产品名称:
小鼠退行性椎间盘髓核细胞
产品编号:
P24468
产品类别:
原代细胞
生长特性:
贴壁生长
培养体系:
专用培养基
传代方法:
可传3代左右
细胞形态:
梭形、多角形
[价格]
规格 价格 库存
5×105cells ¥ 5000 3

产品详情

 

  1. 细胞简介:

    小鼠退行性椎间盘髓核细胞分离退行性椎间盘组织;椎间盘是位于脊柱两椎体之间,分为中央部的髓核,富于弹性的胶状物质;周围部的纤维环,由多层纤维软骨环按同心圆排列。上下有软骨板,是透明软骨复盖于椎体上,下面骺环中间的骨面。上下的软骨板与纤维环一起将髓核密封起来。纤维环由胶原纤维束的纤维软骨构成,位于髓核的四周。纤维环的纤维束相互斜行交叉重叠,使纤维环成为坚实的组织,能承受较大的弯曲和扭转负荷。髓核,是乳白色半透明胶状体,富于弹性,为椎间盘结构的一部分,位于两软骨板与纤维环之间。由纵横交错的纤维网状结构即软骨细胞和蛋白多糖黏液样基质构成的弹性胶冻物质。婴幼儿时期的髓核含水量为80%-90%,即使到了老年,其含水量也在70%上下。髓核在出生时体积大而松散,位于椎间盘的中央,至成年时位置移至椎间盘的中后部;在成年以前构成髓核的主要物质是大量蛋白多糖复合体、胶原纤维和纤维软骨,随着年龄的增长,髓核中的蛋白多糖解聚增多,水分逐渐减少,胶原增粗并逐渐被纤维软骨所替代。

  2. 方法简介:

    实验室分离的小鼠退行性椎间盘髓核细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法并结合软骨细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

  3. 质量检测:

    实验室分离的小鼠退行性椎间盘髓核细胞经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

  4. 培养信息:

    培养基 基础培养基,含FBS、EGF、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
    产品货号 P24468
    换液频率 每3-4天换液一次
    生长特性 贴壁
    细胞形态 梭形、多角形
    传代特性 可传3代左右
    消化液 0.25%胰蛋白酶
    培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%

    小鼠退行性椎间盘髓核细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

    发货时发送细胞电子版照片

    三、使用方法

    人外周血淋巴细胞是一种悬浮细胞,细胞形态呈圆形,在技术部标准操作流程下,细胞不增殖;不传代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。

    客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

    1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。

    2. 悬浮细胞处理

    1)收集T25细胞培养瓶中的培养基至50mL离心管中,用PBS清洗细胞培养瓶1-2次,收集清洗液;

    2)1200-1500rpm离心3min,弃上清,收集细胞沉淀;

    3)加入5mL新鲜完全培养基,用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞;将分散好的细胞调整合适密度接种至培养器皿中,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;

    4)若遇到悬浮细胞团块较大,无法机械吹散时,向步骤2)中细胞沉淀添加0.25%胰蛋白酶消化液2mL至离心管中,用吸-管轻轻吹打混匀,37℃温浴2-3min,消化结束后,加入胰

    酶抑制剂(或血清)终止消化,用吸管轻轻吹打,分散细胞;1200rpm离心5min,弃上清,

    收集细胞沉淀;

    5)加入5mL新鲜完全培养基,用吸管轻轻吹打混匀;按传代比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;

    6)待细胞状态稳定后,培养观察,用于实验;之后再按照换液频率更换新鲜的完全培养基。

    四、注意事项

    1. 培养基于4℃条件下可保存3个月。

    2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。

    3. 消化过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

    4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

    5. 该细胞只可用于科研。

    特殊注意事项

    6. 此细胞为悬浮细胞,请注意不要直接倒掉,造成损失;悬浮细胞因多数胞体较小,离心收集时,请注意悬液中细胞是否收集完全,可适当加大离心转速200转或增加离心时间3-5min,增加细胞获取量。

    备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考

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