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兔胰腺上皮细胞
产品名称:
兔胰腺上皮细胞
产品编号:
P24387
产品类别:
原代细胞
生长特性:
贴壁生长
培养体系:
专用培养基
传代方法:
可传1-2代
细胞形态:
上皮细胞样
[价格]
规格 价格 库存
5×105cells ¥ 5000 3

产品详情

 

  1. 细胞简介:

    兔胰腺上皮细胞分离自胰腺组织;胰腺分为外分泌腺和内分泌腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氢钠、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通过胰腺管排入十二指肠,有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成,胰岛主要由4种细胞组成:α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β细胞分泌胰岛素,降低血糖;γ细胞分泌生长抑素,以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌;PP细胞分泌胰多肽,抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。胰腺干细胞在发育上被认为分离自内胚层胰腺上皮,在随后的胰腺发育过程中,胰腺干细胞分化为胰岛细胞(α、β、δ、PP细胞)、导管上皮细胞以及腺泡细胞。胰腺组织中还存在大量的间充质来源的细胞,包括成纤维细胞、血管内皮细胞、血管平滑肌细胞以及星形细胞,其中以成纤维细胞占主要部分。要离体分离培养获得胰腺上皮细胞就要排除间充质来源的细胞,尤其是成纤维细胞。目前常用的去除成纤维细胞方法有机械刮除法、胰蛋白酶消化以及胶原酶消化法等,胰腺上皮细胞的病变与急慢性胰腺炎的发生具有重大意义。

  2. 方法简介:

    实验室分离的兔胰腺上皮细胞采用胶原酶分次消化法并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

  3. 质量检测:

    实验室分离的兔胰腺上皮细胞经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

  4. 培养信息:

    包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
    培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
    产品货号 P24387
    换液频率 每2-3天换液一次
    生长特性 贴壁
    细胞形态 上皮细胞样
    传代特性 可传1-2代
    消化液 0.25%胰蛋白酶
    培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%

    兔胰腺上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

    客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

    1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。

    2. 贴壁细胞消化

    1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;

    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5mL完全培养基终止消化;

    3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;

    4)待细胞完全贴壁后,培养观察,用于实验;之后再按照换液频率更换新鲜的完全培养基。

    3. 细胞实验

    因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因

    没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。

    四、注意事项

    1. 培养基于4℃条件下可保存3个月。

    2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。

    3. 消化过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

    4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

    5. 该细胞只可用于科研。

    备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考

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