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大鼠骨骼肌卫星细胞
产品名称:
大鼠骨骼肌卫星细胞
产品编号:
P24303
产品类别:
原代细胞
生长特性:
贴壁生长
培养体系:
专用培养基
传代方法:
可传3-5代左右;3代以内状态最佳
细胞形态:
成纤维细胞样
[价格]
规格 价格 库存
5×105cells ¥ 3500 3

产品详情

 

  1. 细胞简介:

    大鼠骨骼肌卫星细胞分离自四肢肌肉组织;骨骼肌又称横纹肌,肌肉中的一种,约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞,肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌,横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官,有丰富的血管、淋巴分布,在躯体神经支配下收缩或舒张,进行随意运动。肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状,不分支,有明显横纹,核很多,且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带(Ⅰ带)及暗带(A带)。明带染色较浅,而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间,有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段,叫做一个肌节。肌卫星细胞指骨骼肌中除骨骼肌纤维(肌细胞)外的一种扁平、有突起的细胞。着于肌纤维(肌细胞)表面;当肌纤维(肌细胞)受损后,肌卫星细胞可增殖分化,参与肌纤维(肌细胞)的修复,因此具有干细胞性质。

  2. 方法简介:

    实验室分离的大鼠骨骼肌卫星细胞采用胰蛋白酶 - 胶原酶混合消化法结合多次差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

  3. 质量检测:

    实验室分离的大鼠骨骼肌卫星细胞经Desmin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

  4. 培养信息:

    包被条件 PLL(0.1mg/ml)
    培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
    产品货号 P24303
    换液频率 每2-3天换液一次
    生长特性 贴壁
    细胞形态 成纤维细胞样
    传代特性 可传3-5代左右;3代以内状态最佳
    消化液 0.25%胰蛋白酶
    培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%

    大鼠骨骼肌卫星细胞体

  5. 客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

    1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。

    2. 贴壁细胞消化

    1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;

    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5mL完全培养基终止消化;

    3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;

    4)待细胞完全贴壁后,培养观察,用于实验;之后再按照换液频率更换新鲜的完全培养基。

    3. 细胞实验

    因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因

    没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。

    四、注意事项

    1. 培养基于4℃条件下可保存3个月。

    2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。

    3. 消化过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

    4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

    5. 该细胞只可用于科研。

    备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考

  6. 外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

联系我们

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