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兔肾小球上皮细胞
产品名称:
兔肾小球上皮细胞
产品编号:
P24271
产品类别:
原代细胞
生长特性:
贴壁生长
培养体系:
专用培养基
传代方法:
可传1-2代
细胞形态:
上皮细胞样
[价格]
规格 价格 库存
5×105cells ¥ 4300 3

产品详情

 

  1. 细胞简介:

    兔肾小球上皮细胞分离自肾组织;肾脏是机体的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物,同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质,如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、碳酸氢钠等,以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能,生成肾素、促红细胞生成素、活性维生素D3、前列腺素、激肽等,又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能,保证了机体内环境的稳定,使新陈代谢得以正常进行。肾小球是肾元中的用于将血液过滤生成原尿的一团毛细血丛,被鲍氏囊所包裹,是尿液形成的重要构造。血液经由入球小动脉进入肾小球。肾小球上皮细胞是由间充质细胞分化发育、衬贴于肾小球血管腔的单层扁平上皮细胞,是肾小球的固有细胞之一,也是构成肾小球滤过膜的重要组成部分。肾小球上皮细胞的正常结构和功能是肾单位滤过及肾小球微环境稳定的重要保障。肾小球滤过膜的最外层为上皮细胞层,厚约40nm,肾小球上皮细胞是肾小囊的脏层上皮细胞,贴附于肾小球血管外侧基底膜上。上皮细胞又称足细胞,足细胞的不规则突起为足突,其间有许多狭小间隙,血液经滤过膜过滤入肾小球囊。肾小球上皮细胞可通过合成和分泌肾上腺髓质肽抑制系膜细胞增殖,肾上腺髓质肽作为一种重要的旁分泌因子,可保持肾小球微环境稳定,并参与肾小球的炎症过程。体外培养的肾小球上皮细胞对各型肾小球肾炎具有重要的研究价值。

  2. 方法简介:

    实验室分离的兔肾小球上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

  3. 质量检测:

    实验室分离的兔肾小球上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

  4. 培养信息:

    包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
    培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
    产品货号 P24271
    换液频率 每2-3天换液一次
    生长特性 贴壁
    细胞形态 上皮细胞样
    传代特性 可传1-2代
    消化液 0.25%胰蛋白酶
    培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%

    兔肾小球上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

  5. 客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

    1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。

    2. 悬浮细胞处理

    1)收集T25细胞培养瓶中的培养基至50mL离心管中,用PBS清洗细胞培养瓶1-2次,收集清洗液;

    2)1200-1500rpm离心3min,弃上清,收集细胞沉淀;

    3)加入5mL新鲜完全培养基,用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞;将分散好的细胞调整合适密度接种至培养器皿中,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;

    4)若遇到悬浮细胞团块较大,无法机械吹散时,向步骤2)中细胞沉淀添加0.25%胰蛋白酶消化液2mL至离心管中,用吸-管轻轻吹打混匀,37℃温浴2-3min,消化结束后,加入胰酶抑制剂(或血清)终止消化,用吸管轻轻吹打,分散细胞;1200rpm离心5min,弃上清,

    收集细胞沉淀;

    5)加入5mL新鲜完全培养基,用吸管轻轻吹打混匀;按传代比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;

    6)待细胞状态稳定后,培养观察,用于实验;之后再按照换液频率更换新鲜的完全培养基。

    四、注意事项

    1. 培养基于4℃条件下可保存3个月。

    2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。

    3. 消化过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

    4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详

    尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

    5. 该细胞只可用于科研。

     

     

    备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考

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