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细胞简介:
人口腔角质形成细胞分离自口腔组织;口腔黏膜在组织学形态上分为上皮、固有层和黏膜下层;口腔黏膜上皮细胞按是否参与角化被分为角质形成细胞与非角质形成细胞,主要由角质形成细胞构成;前者组成复层鳞状上皮,后者游离分布于上皮层内。根据在口腔内部位的不同,复层鳞状上皮可分为角化、不全角化或无角化型等几类。以角化型上皮为例,由上皮的深面至浅面可分为基层、棘层、粒层及角化层等四层。
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方法简介:
实验室分离的人口腔角质形成细胞采用先机械分离法、后胶原酶消化法并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
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质量检测:
实验室分离的人口腔角质形成细胞经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
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培养信息:
| 包被条件 | 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) |
| 培养基 | 基础培养基,含FBS、Penicillin、Streptomycin等 |
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| 换液频率 | 每2-3天换液一次 |
| 生长特性 | 贴壁 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 传代特性 | 2-3代 |
| 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
| 培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% |
人口腔角质形成细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
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细胞培养状态 发货时发送细胞电子版照片
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使用方法人口腔角质形成细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈上皮细胞样,在技术部标准 操作流程下,细胞2-3代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
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客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度 的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。 - 2. 贴壁细胞消化
- 1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
- 2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养 瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变 圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
- 3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至 5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
- 4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
- 3. 细胞实验 因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培 养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因 没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml ),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
- 注意事项
- 1. 培养基于4℃条件下可保存3个月。
- 2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
- 3. 消化过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
- 4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技 术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详 尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
- 5. 该细胞只可用于科研。
- 备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考
- 文献参考:
- 文章标题:Exploring the mechanism of Squamocin inhibits oral squamous cell carcinoma malignant progression by targeting peroxisome proliferator activated receptor-gamma based on network pharmacology and molecular docking
- 作者列表:Daoyong Hu, Qun Dai, Hao Xiong, Tian Zhong
- 影响因子:1.6
- 期刊:Letters in Drug Design & Discovery
- 发表时间:2026-3-7
- DOI:10.1016/j.lddd.2025.100253
