规格 | 价格 | 库存 |
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1×10^6cells/T25培养瓶 | ¥ 8800 | 3 |
细胞背景:hPSC-运动神经元祖细胞是从人类多能干细胞(hPSC)分化得来,该细胞为运动神经元的前体细胞,具有继续向成熟运动神经元(mMN)分化的能力。分化获得的成熟运动神经元(mMN)能表达运动神经元的特异性 Marker(如 CHAT, MAP2 等)
细胞来源:人胚胎干细胞 H1
复苏细胞:将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL MNP维持培养基(含10μM IMC-014-Y)混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL MNP维持培养基(含10μM IMC-014-Y)后混匀。然后将所有细胞悬液加入含适量MNP维持培养基(含10μM IMC-014-Y)的基质胶包被的六孔板(1孔)或35mm皿中培养过夜。24h后,换成不含IMC-014-Y的MNP维持培养基,视培养基颜色或隔2天换液。
细胞传代:(可按培养器皿底面积 1:6 比例接种传代):细胞传代(可按培养器皿底面积1:6比例接种传代):
1、弃去培养基,每孔加入1mL Accutase(含10μM IMC-014-Y),置于37℃培养箱消化4-5min。
2、4-5 min后每孔加入等量 MNP维持培养基(含10μM IMC-014-Y),轻轻吹打细胞,使细胞解离成单细胞。
3、将细胞悬液收集到15 mL离心管中,室温下300 g离心5 min。
4、仔细抽吸上清液,不干扰细胞,用1mL恢复室温的MNP维持培养基重悬细胞(含10μM IMC-014-Y),轻轻地上下移液以确保细胞溶液均匀。
5、使用MNP维持培养基(含10μM IMC-014-Y)稀释细胞,将细胞以1:6比例接种到基质胶包被的六孔板或35mm皿中培养过夜(按底面积算,1个T25相当于六孔板2.5个孔,六孔板1孔可传12孔板的2孔,24孔板的4孔,96孔板的6孔)。24h后,换成不含IMC-014-Y的MNP维持培养基,视培养基颜色或隔2天换液。
培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置2-4h。
4. 客户可购买MNP维持培养基(含MNP维持基础培养基 ;MNP维持培养基补充剂A(200×) ;MNP维持培养基补充剂B(50×)
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
6.该细胞仅供科研使用。