产品分类/PRODUCT CLASSIFICATION
| 规格 | 价格 | 库存 |
|---|---|---|
| 1×10^6cells/T25培养瓶 | ￥ 8800 | 3 |
细胞背景：hPSC-运动神经元是从人类多能干细胞（hPSC）分化得来，该细胞是分化早期的运动神经元，具有继续向成熟运动神经元（mMN）分化的能力。分化获得的成熟运动神经元（mMN）能表达运动神经元的特异性Marker（如CHAT, MAP2等）
培养操作
1）复苏细胞：将含有 1 mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 4 mLNSPC 扩增培养基（含 10μM Y-27632）混合均匀。在 1000 rpm 条件下离心 3 min，弃去上
清液，加 1-2 mL NSPC 扩增培养基（含 10μM Y-27632）后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量 NSPC 扩增培养基（含 10μM Y-27632）的低吸附六孔板（1 孔）或低吸附 35mm 皿
中培养过夜。24h 后，100g 离心弃去上清，换成不含 Y-27632 的 NSPC 扩增培养基，视培养基颜色或隔 2 天半量换液。
2）细胞传代：当神经球直径达 100-150μm 时，即可进行传代培养。
1、100g 离心弃去上清，加入 1-2 mL Accutase（含 10μM Y-27632），置于 37℃水浴消化 10-15 min。
2、10-15 min 后每孔加入等量 NSPC 扩增培养基，轻轻吹打细胞，使细胞解离成小团块或单细胞。
3、将细胞悬液收集到 15 mL 离心管中，室温下 300 g 离心 5 min。
4、仔细抽吸上清液，不干扰细胞，用 1mL 恢复室温的 NSPC 扩增培养基重悬细胞，轻轻地上下移液以确保细胞溶液均匀。
5、使用自动细胞计数器计数细胞，使用台盼蓝排除死亡细胞，使用 NSPC 扩增培养基稀
释细胞，将细胞以 5×105/mL（或 1:2-1:3 比例）接种到低吸附六孔板中。
细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面以低吸附 T25 为例；
1、收集细胞及细胞培养液，装入离心管中，100g 离心 5 min，弃上清液，加入 2 mLAccutase（含 10μM Y-27632）水浴消化 15 min，。
2、根据细胞数量加入神经细胞无血清冻存液，使细胞密度 1×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存 1mL 细胞悬液，注意冻存管做好标识。
3、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h 后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 客户可购买NSPC 扩增培养基（含 NSPC 扩增基础培养基；NSPC 扩增培养基补充剂）。
5. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
6.该细胞仅供科研使用。
7. 备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。
8. 注意： 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 1 个六孔板（或按照底面积换算），必须使用低吸附培养器皿，或经过特殊液体润洗使得细胞难以贴于培养器皿表面。
