规格 | 价格 | 库存 |
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5×105cells/T25或1mL冻存管 | ¥ 6000 | 3 |
支原体检测 | 虎红细胞不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌 | 传代密度 | 细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养 |
细胞背景 | 红细胞(Erythrocytes,RBC)也称红血球,是血液中数量最多的一种血细胞,是脊椎动物体内通过血液运送氧气的最主要的媒介,同时还存在免疫功能。红细胞可以运输氧气,也可以运输二氧化碳。运输二氧化碳时血液呈暗紫色,运输氧气时则呈鲜红色。红细胞会生成于骨髓之内。红细胞老化后,易导致血管堵塞,所以会自动返回骨髓深处,由白细胞负责销毁;或是在经过肝脏时,被巨噬细胞分解,成为胆汁。哺乳动物的红细胞呈两面中央凹的圆饼状,中央较薄。周缘较厚,故在血涂片标本上中央染色较浅、周围较深。新鲜单个红细胞为黄绿色,大量红细胞使血液呈深红色。成熟的红细胞(哺乳动物)没有细胞核和线粒体,富含血红蛋白。依靠葡萄糖合成能量,平均直径为9um。 | ||
分离方法 | 通过无菌采集抗凝血,离心后获得红细胞沉淀,经等量PBS洗涤 2-3次至上清透亮,最终用PBS缓冲液配置不同浓度的红细胞 |
收货处理:取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态
传代密度:细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养
传代代数:可传5代左右;3代以内状态最佳,建议收到细胞后尽快进行相关实验
传代比例:首次传代建议1:2传代,1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
传代方法
1.吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2.添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3.用吸管轻轻吹打混匀,按1:2比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4.待细胞完全贴壁后,培养观察;之后每2-3天换液一次新鲜的完全培养基。
重要提醒
1.培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2.在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3.传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4.运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。
到货须知
1.收到细胞后,首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发,细胞是否解冻,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2.静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照(当天以及第 2,3 天请拍照),记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
3.由于运输的原因,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
4.仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。
重发标准
1.细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发;
2.收到细胞未开封,如出现污染状况,重发;
3.收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发;
4.常温发货的细胞静置 2 小时后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发;
5.常温发货的细胞静置 22 小时并且未开封,出现污染,经核实后,重发;
6.细胞活性问题,请在收到产品 3 天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发;
7.视具体情况而定。
不予重发
1.客户操作造成细胞污染,不重发;
2.客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发;
3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
4.细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前 3 天的细胞状态照片,不重发;
5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发;
6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发;
7.视具体情况而定。