上海细胞库
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| 规格 | 价格 | 库存 |
|---|---|---|
| 1×10^6cells/T25培养瓶 | ￥ 8850 | 3 |
人原代子宫内膜异位基质细胞背景: 子宫内膜异位是妇科常见疾病，可影响5-10%的育龄期妇女，在不孕症患者中患病率高达20-50%，虽为良性疾病，缺具有无限生长、生成新生血管、浸润并破坏周围组织、局部或远处转移等恶性肿瘤的一些特性。
子宫内膜异位是指具有生长活性的子宫内膜组织在子宫腔披覆内膜、肌层以外的其它部位。相关研究表明，与正常子宫内膜间质细胞相比，异位的基质细胞可以通过自身调节适应低氧环境，提高种植成功率，且随着HIF-1α表达增强，细胞增殖能力随之增强，并影响线粒体能量的产生，线粒体数量增多，形态伸长，嵴面积增大，功能更为活跃。
人原代子宫内膜异位基质细胞特性
1) 细胞来源于术后的人子宫内膜异位组织。
2) 细胞鉴定：波形蛋白（Vimentin）免疫荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式：梭形，不规则细胞，贴壁培养。
人原代子宫内膜异位基质细胞收货后处理
A、复苏细胞处理方法：培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是运输细胞的最好办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶，严格无菌后将细胞瓶放置培养箱中静置2-4小时以稳定细胞状态。静置后显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（最好40x,100x,200x各一张），前三天照片是重要售后依据，不提供照片默认收到状态良好。
B、冻存细胞处理方法：收到细胞后，观察泡沫箱中干冰是否有剩余，冻存管是否完好无损是否有解冻情况，若发现干冰完全汽化或冻存管有解冻破损现象，请及时拍照并与我们联系。如果细胞签收三天内未与我们联系，则默认为收货良好。复苏第一管如有活性问题，请及时联系我们，技术人员与您沟通指导后再复苏第二管，未与我方联系擅自复苏第二管出现问题不予售后。
人原代子宫内膜异位基质细胞培养步骤
a、细胞传代：如细胞密度超过80%，即可进行传代培养，步骤如下：
1) 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次；
2) 加1mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置培养箱中消化 1min ，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后，加6ml含10%血清的完全培养基终止消化；
3) 轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出至离心管中，1000 rpm离心5-8min，弃去上清液，补加1-2mL完全培养基后吹匀；
4) 按5-6mL每瓶补加完全培养基，将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 mL完全培养基的6cm培养皿中或者T25培养瓶中。
（即1个T25瓶传代接种至2个T25瓶或者2个6cm的培养皿）
b、细胞冻存：细胞收集参照传代步骤，冻存数量，推荐每支冻存管按5×106左右细胞数量冻存，加入1ml的我司无血清冻存液（货号：C7001），轻轻混匀后，放-80℃冰箱，24小时后转入液氮罐中。
C、细胞复苏：从液氮灌或-80℃冰箱中找到需要复苏的细胞，水浴锅提前打开预热37℃。
1) 将冻存细胞在37℃水浴中迅速摇晃解冻；
2) 将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的离心管中，1000 rpm离心5min；
3) 弃去上清液，补加5mL完全培养基后吹匀，接种于T25培养瓶中（或6cm皿中），培养过夜，第二天换液并检查细胞密度。人原代子宫内膜异位基质细胞
