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3T3-L1成脂诱导分化培养基
产品名称:
3T3-L1成脂诱导分化培养基
英文名称:
型号:
D102
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产品详情

本产品是专为3T3-L1(脂肪前体细胞)研制优化的HyCyteTM成脂诱导分化培养基试剂盒,用于增强3T3-L1(脂肪前体细胞)向成脂细胞方向诱导分化的能力。在库产品均通过生物安全检测和产品质量检测,体系稳定有效,现货发送,性价比高。雅吉生物专业的研发团队可提最有效的技术指导,保证售后品质。
| 质检标准
pH:7.2~7.4
内毒素含量:<10 EU/mL
生物安全:细菌、真菌、支原体检测阴性
质量检测:诱导测试合格
| 运输方式产品冰袋冷藏运输
| 检验原理:油红O染料属于苏丹染料家族的一员,是一种脂溶性的偶氮染料。显色明显便于观察,主要用于脂肪染色。干细胞在诱导培养基的作用下,会逐渐分化成前成脂细胞和脂肪细胞,将形成大
小不一的脂滴。油红O在脂肪中的溶解度大于其在染色液中的溶解度,从而使脂肪着色呈现红色或橘红色。

| 使用说明
1. 成脂诱导分化操作
1.1 接种干细胞取对数生长期的细胞, 按 照 2.0×10e4cells/cm2的细胞密度接种至培养器皿,于 37℃,5% CO2培养环境下培养至汇合度 90~100%,弃掉上清,加入成脂诱导分化培养基诱导液。
NOTE:如细胞贴壁性较差,建议使用 0.1%明胶对培养底面进行包被。
1.2 细胞分化诱导于 37℃,5% CO2培养环境下培养约 3 天,更换为成脂诱导分化培养基维持液,培养 1 天后,再更换为成脂诱导分化培养基诱导液,继续培养3 天。按照以上换液频率诱导 14~21 天,并注意观察细胞形态变化。根据细胞诱导形成的脂滴数量和大小,决定终止细胞诱导的时间,并进行染色鉴定。
2. 染色鉴定
2.1 细胞固定
吸去培养基使用适量 1×PBS 清洗一次,弃去后取适量 4%中性甲醛溶液覆盖培养器皿底面,室温固定 30~60 min,弃去固定液再使用 1×PBS 清洗两次。
2.2 油红 O 染色
取生理盐水或1×PBS与油红O原液配制油红O工作液(油红O原液: 生理盐水=3:2),现用现配。配制后可对油红O工作液进行离心,以沉淀染色液中的过饱和析出物。向清洗干净的诱导孔
内加入适量油红O工作液,静置染色30min。吸走油红O工作液,用1×PBS清洗两次,并加入适量1×PBS避免细胞干燥。
2.3 诱导评估
显微镜下观察成脂染色效果,并进行图像采集和诱导评估。诱导成功时,脂滴与油红 O 染料结合后呈现红色或橘红色。
NOTE: 干细胞的成脂分化水平因细胞类型、细胞供体来源,培养条件、细胞代次、细胞状态和分化时间等因素而异。

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