种属: 人源（Homo sapiens）
组织来源: 骨（Bone）
疾病: 骨肉瘤（Osteosarcoma）
年龄: 15 岁（15 years）
性别: 女（Female）
细胞类型: 表皮细胞（Epithelial）
生长特性: 贴壁生长（Adherent）
1. 请立即检查包装袋是否有破损或漏液
2. 请立即将细胞培养瓶从包装盒中取出，并按照下方操作步骤进行培养传代
注意：如为冻存管，请收到后立即解冻培养。若来不及解冻，请储存于液氮中（存储于负80度，会降低细胞存活率）培养瓶中细胞操作步骤对于贴壁培养的细胞，寄送前，我们会将培养基充满整个培养瓶，以减少产品运输过程中贴壁细胞的脱落。
1. 收到细胞产品后，请注意观察是否有污染。将培养瓶置于倒置显微镜下仔细检查是否浑浊、是否细菌污染。因在运输过程中存在颠簸，且有些细胞对温度变化也很敏感，可能存在一些细胞脱落漂浮的情况，这些细胞仍是活细胞，请勿丢弃，可离心富集后传代使用。
2. 对于贴壁的细胞，在生物安全柜环境中，用真空泵去除培养瓶中的多余培养基，至剩余5-8mL左右，随后将细胞置于含有5%CO的37℃恒温 培养箱中培养，拧松瓶盖。如果细胞已经长满培养瓶请立即传代。
3. 对于悬浮的细胞，在生物安全柜环境中，转移培养瓶中的细胞离心管中，离心200×g / 5 - 10 min，去除上清后，用5 mL培养基吹散细胞，转移至新的培养瓶中，随后置于含有5% CO 的37℃恒温培养箱中培养。
冻存细胞操作步骤
注意：为保存细胞的高存活率，请收到产品后，立即解冻培养。
1.将冻存管置于37℃ 水浴中来回晃动，迅速解冻。为避免污染，确保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速，大约2分钟。
2. 一旦冻存管中液体融化后，立即取出，采用 70%酒精喷拭冻存管表面。从此步开始，后续操作须在生物安全柜中完成。
3.将冻存管中的液体转移到含有5mL完全培养基的离心管中， 离心
4. 用完全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。为保证细胞复苏的存活率，请将培养基在37℃水浴预热后使用。
5. 将细胞置于含有5%
1. 请立即检查包装袋是否有破损或漏液
2. 请立即将细胞培养瓶从包装盒中取出，并按照下方操作步骤进行培养传代
注意：如为冻存管，请收到后立即解冻培养。若来不及解冻，请储存于液氮中（存储于负80度，会降低细胞存活率）贴壁200×g / 5 - 10 min，用真空泵去除含有冻存液的上清。CO 的37℃恒温培养箱中培养。
细胞传代培养
1. 吸取并弃掉培养瓶中培养基，加入PBS洗涤一次。
2. 加入 1.0 mL 0.25（w/v）Trypsin-0.53mM EDTA溶液，并置于37℃培养箱中孵育，直至细胞从壁上脱落分离。此过程大约需要3至5分钟（此处为12.5 cm2培养瓶所用体积，可根据实际情况增减用量）。
3. 加入2mL完全培养基中和胰蛋白酶，并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落，并使细胞分散。
4. 离心
5. 将细胞置于含有5%
传代比例：建议 1:2 至 1:3（以培养瓶底面积计算）
培养基换液: 每隔 2 至 3 天。
细胞冻存液，请使用产品： Cryo Frozen Medium (Cat#CTCC-002-002)
离心收集细胞后，加入适量冻存液（每管细胞冻存量达到10的6次方），将冻存管放入冻存盒置于负80冰箱，24h后将冻存管转入液氮长期保存。
贴壁细胞传代培养
该细胞系培养所用基本培养基为 Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium(DMEM), 配置完全培养基时需加入10%FBS，1% Anti-Anti。药物抗性维持加药浓度为1.5 ug/mL DDP。
注意：耐药细胞，需先无药培养稳定后保种再进行加药培养，按照3次梯度加药：最大剂量1/4，最大剂量1/2，最大剂量。
