产品分类/PRODUCT CLASSIFICATION
| 规格 | 价格 | 库存 |
|---|---|---|
| 96T | ￥ 2200 | 10 |
1 原理及用途
恩诺沙星酶联免疫检测试剂盒（饲料专用）采用间接竞争ELISA方法检测饲料样本中的恩诺沙星（Enrofloxacin，ENR），试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时，加入标准品或样品溶液，样本中的恩诺沙星和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗恩诺沙星抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光度值与其所含恩诺沙星含量成负相关，与标准曲线比较即可得出样本中恩诺沙星的残留量。
2 技术指标
2.1 试剂盒灵敏度：0.1ppb(ng/ml)
2.2 反应模式：25℃，45min～15min
2.3 检测下限：
饲料……………………………………8ppb
2.4 交叉反应率：
恩诺沙星………………………………100%
噁喹酸…………………………………28%
左氧氟沙星……………………………10%
洛美沙星………………………………4%
麻保沙星………………………………4%
沙拉沙星………………………………2%
2.5 样本回收率：
饲料……………………………………85%±15%
3 恩诺沙星酶联免疫检测试剂盒（饲料专用）恩诺沙星酶联免疫检测试剂盒（饲料专用）组成
酶标板……………………………96孔
标准液：各1ml
0ppb、0.1ppb、0.3 ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb
高标准液（红盖）：1ppm …………1ml
酶标记物（红盖）……………………5.5ml
抗体工作液（蓝盖）…………………5.5ml
底物液A（白盖）……………………6ml
底物液B（黑盖）……………………6ml
终止液（黄盖）………………………6ml
20×浓缩洗涤液（白盖）……………40ml
5×复溶液（黄盖）…………………50ml
说明书…………………………………1份
盖板膜…………………………………1张
自封袋…………………………………1个
4 需要的器材和试剂
4.1 仪器：酶标仪、打印机、均质器 、氮气吹干装置、振荡器、离心机、刻度移液管、天平（感量0.01g）
4.2 微量移液器：单道20µl-200µl，100µl-1000µl、多道300µl
4.3 试剂：无水乙腈、正己烷、浓HCl
5 样本前处理
5.1 样本处理前须知：
实验器具必须洁净并使用一次性吸头，以避免污染干扰实验结果。
5.2 配液：
配液1：0.15M盐酸溶液
取5ml浓盐酸，加入去离子水混匀，定容至400ml。
配液2：样本提取液
量取10ml 0.15M盐酸溶液（配液1）加入到90ml无水乙腈中混合均匀。
配液3：复溶液
将5×复溶液用去离子水5倍稀释（1份复溶液加4份去离子水），用于样本的复溶，复溶液在4℃环境可保存一个月。
配液4:工作洗涤液
将浓缩洗涤液20倍稀释(1份洗涤液加19份去离子水)。
5.3 样本前处理步骤：
5.3.1 饲料处理方法
1）称取1.0±0.05g 粉碎后饲料样本于50ml离心管中；
2）加入8ml样本提取液（配液2），振荡5分钟，室温4000转/分离心10分钟；
3）取2ml清澈上层有机相至洁净干燥的10ml玻璃试管中，50-60℃水浴氮气吹干；
4）加入2ml正己烷，振荡30s，再加2ml复溶液（配液3），振荡2分钟，室温4000转/分离心10分钟；
5）去除上层正己烷，取最下层清澈水相50µl于1.5ml离心管中，再加入450ul复溶液（配液3），振荡混匀30s，取50ul分析。
样本稀释倍数：80 检测下限：8ppb
6 酶联免疫试验步骤
将所需试剂从4℃冷藏环境中取出，置于室温平衡30min以上, 洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解，每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架，将不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。
6.1 编 号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。
6.2 加样反应：加标准品或样本50µl/孔到各自的微孔中，然后加酶标记物50µl/孔，再加入50µl/孔的抗体工作液，用盖板膜封板，轻轻振荡5秒混匀，25℃反应45分钟。
6.3 洗 涤：小心揭开盖板膜，甩去孔内液体，每孔加350ul工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，最后一次拍干（用吸水纸拍干，拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破）。
6.4 显 色：每孔加入底物液A 50µl，再加底物液B 50µl，轻轻振荡5秒混匀，25℃避光显色15分钟（若蓝色过浅，可适当延长反应时间）。
6.5 终 止：每孔加入终止液50µl，轻轻振荡混匀，终止反应。
6.6 测吸光值：用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值（建议用双波长450/630nm）。测定应在终止反应后10分钟内完成。
7 结果分析
7.1 百分吸光率的计算
