规格 | 价格 | 库存 |
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96T | ¥ 2200 | 10 |
【产品名称】
通用名:禽白血病病毒P27抗原检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名:Avian Leukosis Virus P27 Antigen Test Kit(ELISA)
【包装规格】 96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒
【预期用途】 禽白血病(Avian Ieukemia,AL)作为一种鸡独有的病症,广泛存在于我国养禽业,是危害我国养鸡业的一种重要疾病。
p27蛋白是禽白血病病毒的重要组成蛋白之一,不仅构成ALV病毒粒子的衣壳,还是ALV主要的结构蛋白,占禽白血病病毒总蛋白含量的30%,且p27蛋白氨基酸序列高度保守,含有反转录病毒的群体特异性抗原,易于被检测到。所以在企业实际生产实践中,通常选择ELISA试剂盒这种设备简单、操作方便的方法来对禽白血病进行快速筛查。
本试剂盒用于检测鸡的卵清、胎粪、组织样品及细胞培养物中禽白血病病毒 p27抗原。
【禽白血病病毒P27抗原检测试剂盒(酶联免疫法)组成】
序号 | 名称 | 规格/96T×1 | 规格/96T×2 | 规格/96T×5 |
1 | 酶标记物 | 11ml×1(红盖) | 11ml×2(红盖) | 26ml×2(红盖) |
2 | 20X浓缩洗涤液 | 40ml×1(白盖) | 40ml×1(白盖) | 200ml×1(透明) |
3 | 底物显色液 | 10ml×1(黑盖) | 10ml×2(棕盖) | 25ml×2(黑盖) |
4 | 终止液 | 5ml×1(黄盖) | 10ml×1(黄盖) | 25ml×1(黄盖) |
5 | 阳性对照 | 1.0 ml×1(红盖) | 1.5 ml×1(红盖) | 2.0 ml×1(红盖) |
6 | 阴性对照 | 1.0 ml×1(绿盖) | 1.5 ml×1(绿盖) | 2.0 ml×1(绿盖) |
7 | 酶标板 | 96T×1 | 96T×2 | 96T×5 |
8 | 盖板膜 | 1 | 2 | 5 |
9 | 自封袋 | 1 | 1 | 2 |
10 | 说明书 | 1 | 1 | 1 |
【储存及有效期】2~8℃保存,有效期12个月。
包被板开封后请于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限为2个月。
【适用仪器】 含630nm波长的酶标仪,25℃恒温设备,可调微量移液器。
【样品准备】
1.样品处理
1.1 卵清:取全蛋,破碎后取稀卵清,直接进行检测。冻融可以降低卵清的粘稠度。
1.2 胎粪:将胎粪放入含有0.5ml工作洗涤液的离心管中,反复冻融 2 次。恢复室温后,5000r/min离心2分钟,取上清进行检测。
1.3 组织样品:取0.5g组织病料于研磨器剧中,加入0.5ml工作洗涤液匀浆,将组织悬液转移至离心管中反复冻融 2 次,5000r/min离心2分钟,取上清进行检测。
1.4 细胞培养物:将细胞培养物反复冻融 2 次。恢复室温后,5000r/min离心2分钟(若为细胞培养板,则需静置30分钟),取上清进行检测。
2.洗涤液的配制
浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释成工作洗涤液(如19份蒸馏水或去离子水+1份浓缩洗涤液),如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。
【禽白血病病毒P27抗原检测试剂盒(酶联免疫法)检验方法】
1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
2.取所需用量酶标板条,设阴性、阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
3.阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl;样品孔每孔加100μl。
4.混匀,盖好盖板膜,置室温(20~25℃)(推荐水浴)避光反应1小时。
5.甩去孔内液体,每孔加300μl工作洗涤液,无需静置,甩掉板孔中的洗涤液,重复洗涤5次,最后一次拍干。
6.每孔加酶标记物100μl,盖好盖板膜,置室温(20~25℃)避光反应1小时。
7.洗涤,同步骤5。
8.每孔加入底物显色液100μl,置室温( 20~25℃)避光反应15分钟。
9.每孔加入终止液50μl,混匀,10分钟内于630nm测定各孔吸光值。
【参考值】 实验正常的情况下,阴性对照的平均OD值即ODNC应<0.2,阳性对照的平均OD值即ODPC应大于≥0.5
S为样品孔OD630nm值,P为阳性对照OD630nm平均值。
如果S/P>0.2,判为阳性;
如果S/P≤0.2,判为阴性。
【试验方法的局限性】
该试验仅作为定性检测禽白血病病毒P27抗原,根据S/P值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。
【注意事项】
1.实验操作时需戴手套、穿工作衣,严格健全和执行消毒隔离制度,各种实验废弃物都应按传染物处理。
2.终止液具有腐蚀性,应避免接触皮肤和衣物,如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。
3.若试剂盒阴阳性对照、酶标记物出现少量悬浮物,属于正常现象。
4.酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋,未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存。
5.浓缩洗涤液在低温时容易结晶,使用时需恢复至室温以完全溶解。
6.洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。
7.用于检测的样品应保持新鲜。
8.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。
9.不同批号试剂组分不得混用。