原代人Ⅱ型肺泡上皮细胞永生化-上海雅吉生物科技有限公司

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T25	￥ 2800	1

一. 产品概述

人Ⅱ型肺泡上皮原代永生化细胞是通过基因改造技术，使原代Ⅱ型肺泡上皮细胞获得无限增殖能力，同时保留其关键生物学特性。这类细胞广泛应用于肺部疾病研究、药物筛选、毒理学评估以及肺泡再生等领域。

传代比例

1:2至1:3

倍增时间

24-30小时

细胞描述

永生化：通过基因改造实现无限增殖，避免原代细胞寿命限制。

功能保留：保持Ⅱ型肺泡上皮细胞的典型功能，如表面活性物质分泌和肺泡修复能力。

高纯度：经过严格筛选和鉴定，确保细胞纯度。

稳定性：细胞性状稳定，适合长期实验研究。

广泛应用：适用于肺部疾病模型构建、药物筛选、毒理学研究及组织工程。

细胞鉴定：通过免疫荧光和PCR鉴定细胞类型。

本库的细胞仅用于科研工作，未经许可不得用于其他目的，使用者不得将本库细胞转让给第三者。

培养备注

细胞敏感，容易收缩脱落，请按技术支持的指导处理。

应用领域
基础研究：研究Ⅱ型肺泡上皮细胞的生物学特性及功能。
疾病模型：构建肺部疾病模型（如肺纤维化、急性呼吸窘迫综合征等）。
药物筛选：评估药物对肺泡上皮细胞的影响。
毒理学研究：测试环境毒素或药物对肺泡上皮的毒性。
组织工程：用于肺泡修复和再生研究

质量控制

无菌检测：确保无细菌、真菌污染。
支原体检测：确保无支原体污染。
细胞鉴定：免疫荧光染色：检测Ⅱ型肺泡上皮细胞标志物（如SP-A、SP-C）。
- PCR检测：验证细胞特异性基因表达。
功能验证：检测表面活性物质分泌功能。
注意事项
- 操作规范：严格无菌操作，避免污染。
- 储存条件：
  - 液氮长期保存。
  - -80°C短期保存（不超过6个月）。
- 使用期限：按供应商说明，通常建议在复苏后2个月内使用。
- 培养建议：使用专用培养基，定期更换培养基，避免细胞过度融合
- 售后服务
  - 技术支持：提供细胞培养、传代及冻存的技术指导。
  - 质量保证：提供细胞鉴定报告和质量检测证书。
  - 问题解决：针对实验中的问题提供专业解答。

二，细胞收到后处理：

细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作，培养箱静置2-4小时。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液收集至离心管中，加入6ml完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。（注意发货的是密封培养瓶的话，放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松）

细胞培养步骤：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

1、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。

方法三：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。

1）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。弃培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，进行离心收集，1000RPM条件下离心8-10分钟，去除上清，按冻存数量加入血清及DMSO，冻存比例为90%FBS+10%DMSO

PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右完全培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。