规格 | 价格 | 库存 |
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T25 | ¥ 3580 | 1 |
细胞详述:肾静脉,起自肾门,在同名动脉前方横向内侧注入下腔静脉,越过腹主动脉前面,并接受左肾上腺静脉和左睾丸(卵巢)静脉。平滑肌细胞的生长能力为原发血管疾病的重要异常因素;平滑肌细胞能够表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,其参与血管壁的炎症反应,并与血管疾病的进展和稳定相关。
三、使用方法 大鼠海绵体平滑肌细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈成纤维细胞样,标准操作流程下,细胞可传3-5代左右;3代以内状态最佳;建议您收到细胞后尽快进行相关实验 。 客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度 的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化 1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养 瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变 圆后,再加入5ml完全培养基终止消化; 3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5 mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养; 4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞实验 因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培 养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因 没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml ),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详 尽告知细 胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。