产品简介:基底膜是动物体内上皮细胞基底面的一层基质膜。该基质胶是从Engelbreth-Holm-Swarm(EHS)小鼠肿瘤组织提取的基底膜成分,所形成的基质胶。该基质胶主要成分为laminin,collagen IV,heparan sulfate proteoglycans(Kleinman et al. 1986)。同时,该基质胶也包含多种生长因子,例如表皮生长因子EFG,血小板衍生生长因子PDGF,神经生长因子NGF,碱性成纤维细胞生长因子FGF-2,乙型转化生长因子TGF-beta和胰岛素样生长因子ILGF(Vukicevic et al. 1992)。
产品来源:
Engelbreth-Holm-Swarm(EHS) 小鼠肿瘤基底膜成分
产品储存:
建议您融化后先按照单次用量进行分装,保存-20°C冰箱,有效期2年。
产品性质:
本品在4°C条件下为液态,但在加热到37°C时呈凝胶状态。基质胶凝固后,重新放回4°C过夜,基质胶可再次液化。
注意事项:
该基质胶在温度高于10°C时就会开始凝固成胶,所以尽量在冰上操作基质胶。类器官传代时,如果为了避免酶对类器官造成影响,可直接用4°C预冷的基础培养基对基质胶进行缓慢吹打,即可将类器官从基质胶中释放出来。
产品应用:
本品适用于以无饲养层方法进行人胚胎干细胞hES、诱导多能干细胞ips的扩增和维持。
操作方法:
人胚胎干细胞hES和诱导多能干细胞ips无饲养层培养法(操作所需时间为1小时)
1.将基质胶于4°C冰箱里的冰浴中过夜解冻,并用预冷的枪头,对基质胶进行缓慢吹打5次,进行混匀。注意不要产生气泡。如产生气泡,通过掌上离心机低速短暂离心去除气泡。
2.将细胞培养板放置于培养箱预热。
3.用预冷的枪头将解冻的基质胶进行分装。
4. 用4°C预冷的无血清培养基将基质胶原液以1:100的比例进行稀释,然后将基质胶稀释液均匀铺开并完全覆盖培养板。推荐修饰培养板所用的基质胶稀释液的量为300µL/cm2。
5.将含有修饰液的培养板在室温静置一小时。
6.吸掉修饰液,并在培养板上立即种上干细胞与培养基(mTeSR1)混合液。注意一定不要让修饰过的培养板表面变干。