中文名称小鼠胰岛素酶联免疫检测试剂盒 

英文名称Mouse insulin elisa kit 

样品类型血清/血浆/细胞培养上清/尿液/组织样本 

检测范围0.17-5.5 ng/mL 

灵敏度0.09 ng/mL 

反应时间3.5h 

 

背景介绍:

胰岛素是糖代谢中最主要的激素之一。胰腺的3细胞岛细胞产生胰岛素前体 蛋白，前体蛋白被加工成C肽和胰岛素。它们以等摩尔浓度进入血循环中。成熟的 胰岛素由A、B两条链组成。这两条链是通过两个二硫键桥接形成有功能的胰岛 素分子。血浆葡萄糖浓度的变化是胰岛素产生并分泌的最主要刺激因素，产生的 胰岛素具有一些代谢调节作用。其最主要的作用是，将外周血中糖转运到肝脏中 贮存起来。一些诸如肝糖生成障碍或在促进血糖升高的激素诸如胰高血糖素、肾 上腺素、生长激素和皮质醇等作用下促进肝糖分解都可拮抗胰岛素的作用。

［檢测原理:

Solarbio(Solarbio*)ELISA试剂盒采用基于双抗体夹心法的醯联免疫吸附检 测技术。胰岛素捕获抗体已预包被于酶标板上，当同时加入标本或参考品和HRP 耦连的抗小鼠胰岛素抗体时，其中胰岛素的不同位点会与捕获抗体和HRP偶联 的抗小鼠胰岛素抗体结合，形成夹心复合物，锚定在固相载体板上，其它游离的 成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂，若样本中存在胰岛素将会形成免 疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液 后呈黄色。通过酶标仪检测，使其450nm处的OD值，胰岛素浓度与OD450值之 间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中胰 岛素浓度。

 

2. 灵敏度：

最低可检测小鼠Insulin浓度达0.1ng/ml,

20个零标准品浓度OD的平均值加上两个标准差，计算相应的可检测浓度。

3. 特异性：

不与IGF-U IGF-IU小鼠C肽、大鼠C肽反应，与猪胰岛素、绵羊胰岛素、大鼠胰 岛素、牛胰岛素及人胰岛素分别有628%, 256%, 146%, 110%和195%交叉反 应。

4. 重复性：

板内，板间变异系数＜10%

5. 回收率：

在选取的健康小鼠血浆、细胞培养上清中加入3个不同浓度水平的小鼠Insulin计 算回收率。

I样本类型	平均回收率(%)	范围(%)I
血浆	93	86-101
细胞培养上清	95	87-103

 

6. 线性稀释：

分别在选取的4份健康小鼠血浆和细胞培养上清中加入高浓度小Mlnsulin,在标 准曲线动力学范围内进行稀释，评估线性。

 

I稀释比例	回收率(%)	血浆	细胞培养上清I
1:2	平均回收率(% )	96	102
	范围(％)	88-105	92-113
1:4	平均回收率(% )	98	103
	范围(％)	90-107	94-112

 

注意事项:

1. 试剂盒应在有效期内使用，请不要使用过期的试剂。

2. 试剂盒未使用时应保存在2-8P冰箱，已复溶但未用完的标准品，请丢弃。

3. 试剂盒使用前请在室温恢复30min,且充分混匀试剂盒里的各种成份及制备的 样品。

4. 在试验中标准品和样本建议作复孔检测，且加入试剂的顺序应保持一致。

5. 为避免交叉污染，请在试验中使用1次性试管，枪头，封板膜（淤）及洁净塑料容 器。

6. 浓缩生物素化抗体和浓缩酶结合物的体积较少，在运输过程中微量液体会沾到 管壁及瓶盖上，使用前清离心处理（5-10S即可），使管壁上的液体集中在管底 部，取用时,请用移液器小心吹打几次。

7. 除了试剂盒中的浓缩洗涤液和终止液可以通用外，请不要使用其他来源试剂盒 内含的试剂代替本试剂盒中的某单个组分。

8. 为保证结果准确，每次检测均需做标准曲线。

I安全提示:

试剂盒中的终止液为酸性溶液，操作人员在使用时请带上手套并注意防护； 在操作过程中也要避免试剂接触皮肤和眼睛，如果不慎接触，请用大量滑水滑 洗；检测血液样本及其它体液样本时，请按国家生物实验室安全防护有关管理规 定执行。

说明书

1份

1份

 

自备实验器材（不提供，可代购）1

1. 酶标仪（主波长450nm,参考波长630nm）

2. 高精度移液器及一次性吸头：0.5-10,2-20,20-200,200-1000 n I

3. 洗板机或洗瓶

4.