蛋白脱盐柱0.5ml-上海雅吉生物科技有限公司

规格	价格	库存
0.5ml	￥ 2160	6

产品概述 product description

蛋白脱盐柱是一种方便的蛋白脱盐工具，只需要离心操作即可以用来对蛋白质液体样本进行脱盐，还可以用于蛋白质、抗原、抗体、酶和微生物的浓缩纯化。也可以用来对蛋白质样品中的盐分、糖类、核酸、非水溶剂及其他一些低分子量物质进行去除和缓冲液置换。还可以用来分离蛋白质标记时未结合上的游离标记物。蛋白脱盐柱使用蛋白质低吸附性的BBproExtraTM再生纤维素过滤膜制造，具有快速、方便、回收率高的特点，可替代并优于透析法脱盐及蛋白沉淀法蛋白浓缩。蛋白脱盐柱有多种规格可供选择。可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、液体、土壤等不同样本的蛋白提取试剂盒，包含用于非双向电泳和双向电泳等不同下游应用的试剂盒以及含去垢剂成分和不含去垢剂成分的蛋白提取试剂盒，总计300多种蛋白提取试剂盒可供选择。还可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体等不同细胞器的提取试剂盒。

保存温度

室温

注意事项

1.脱盐柱配有2个微量离心套管。
2.在操作过程中，一个可用于收集滤出液，而另一个用于回收脱盐后的样本。
3.用过的脱盐管要保持过滤膜湿润，不能干掉。

有效期

一年

产品特点

1、高回收率 >90%；
2、垂直结构的膜减少了浓差极化，加快离心速度，快达 5 分钟；
3、热密封膜将下游溶出物污染可能性降到最低；
4、 100% 完整性检测确保性能可靠；
5、透明外壳和体积刻度方便样品察看；
6、直接吸取样品减少处理步骤；
7、高浓缩倍数：高达80–100 倍

仪器准备

1.离心机；可容纳1.5ml微量离心管的固定角度转子离心机。
2.移液器
3.冰箱

试剂准备

1.纯水

耗材准备

1.离心管
2.吸头

使用注意事项

1.不同的蛋白脱盐的速度不同，有的需要长时间离心，有的则很快就好。和蛋白样品纯度，所用buffer类型，蛋白的浓度有关系。离心时要先短些时间，观察一下脱盐速度；
2.如果需要多次重复使用，离心速度不要太高；
3.重复使用时要仔细检查管壁上有没有裂纹；
4.脱盐柱浓缩蛋白会有蛋白损失，样品体积大就分批离心，尽可能不要离心时间太长
5.样品里的杂质如果可能尽量在离心前去除一些。
6.分子量小于5kD的溶质可能只有部分被截留。2kD的样品截留率大约只有40%。过滤膜的截留率取决于溶质的分子大小和形状。目的蛋白小于5kD的样品不要使用脱盐柱脱盐。
7.浓缩液的样本回收率低可能是由于吸附损失、过度浓缩，或样本穿过滤膜而造成的。
8.吸附损失取决于溶质浓度、疏水性、与过滤脱盐管表面接触的温度和时间、样本成分及pH。为了最大限度降低损失，离心后请立即回收脱盐后的样本。
9.如果样本的起始浓度很高，请监控离心过程，以免样本过度浓缩。过度浓缩会导致沉淀，这也可能带来样本损失。
10.样本有可能穿过滤膜，务必将每次的滤过液一直保留到脱盐的样品分析测试完成。
11.样品蛋白最低起始浓度为25ug/ml。
12.加蛋白液或Buffer到脱盐管时，可以用蓝枪头；但从脱盐管底吸取脱盐好的目的蛋白时，必须用黄枪头；用枪头伸入脱盐管中时，必须防止碰到滤膜，以免戳破滤膜。

使用方法

清洗浓缩柱：
1. 用缓冲液或纯水进行预清洗。也可先用0.1 M NaOH清洗，再用缓冲液或纯水进行二次清洗。
2. 离心管中的过滤膜一旦润湿后应避免变干。如果在预清洗后不是立即使用，则让液体保留在滤膜上，直到使用。

浓缩使用方法：
操作步骤：
1. 将内管插入所提供的一个微量离心管中。
2. 向内管中加入不超过500 ul的样本，并盖上盖子。
3. 将盖好盖子的浓缩管放入离心转子中，让盖子的连接带朝着转子的中央；用一个类似的离心管平衡。
4. 以2000-10000 x g离心约10-30分钟。
5. 离心结束后将整个浓缩管从离心机中取出，取出内管。
6. 为了回收浓缩后的溶质，将内管倒过来插在另一个干净的微量离心管中。放在离心机中，让打开的盖子朝着转子的中央；用一个类似的离心管进行平衡。以1,000 x g离心2分钟，使浓缩后的样本从浓缩内管转移到收集管中。滤液可以保存在收集管中。

脱盐使用方法：

操作步骤：
1. 把样品置于过滤装置的储液管中；
2. 如果样品体积小于过滤装置的最大体积，则可以把它稀释到最大体积后再离心，这有助于更有效地除去盐分；
3. 在特定的离心力下和推荐的时间进行离心；
4. 将滤过液从滤管中取出，放置一旁；
5. 加入水或缓冲液使样品体积达到0.5ml；
6. 再次离心；
7. 取出滤过液，放置一旁；
8. 回收浓缩的已脱盐样品。

清洗和保存：
1. 使用后用水冲洗干净；
2. 内管加入超纯水500µl，5000g离心5分钟；
3. 净内管中的水，加入500µl 0.1M NaOH，5000g离心20分钟；
4. 用0.1M NaOH 浸泡24小时；
5. 用水冲洗干净；
6. 用无菌水浸泡2-8℃保存。
7. 外管用自来水洗净后，用超纯水冲洗干净，晾干。

常见问题分析

1.蛋白脱盐柱会损失蛋白吗？
分子量小于3000 Da的蛋白质或多肽样品会穿透过滤膜，不适合用本脱盐柱进行脱盐。3000 -6000Da的蛋白质会有少量损失。6000Da以上的蛋白质损失很小。
2.膜会因为离心时间过长而变干么？
不会，因为脱盐柱有死体积，总会有溶液残留在滤管中。死体积大约10-20ul。
3.可以重复使用脱盐柱么？
可以重复使用。如果使用、清洗、保存得当，可以反复使用多次。但是多次重复使用后过滤膜有破损风险，注意使用过程中尽量避免尖锐物品戳到膜。离心力不要过大。

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