产品描述:本产品是专为MC3T3-E1(小鼠颅顶前骨细胞)研制优化的成脂诱导分化培养基试剂盒,用于增强MC3T3-E1(小鼠颅顶前骨细胞)向成脂细胞方向诱导分化的能力。在库产品均通过生物安全检测和产品质量检测,体系稳定有效,现货发送,性价比高。
专业的研发团队可提供最有效的技术指导,保证售后品质。
质检标准:pH:7.2~7.4
内毒素含量:<10 EU/mL
生物安全:细菌、真菌、支原体检测阴性
质量检测:诱导测试合格
运输方式:产品冰袋冷藏运输
检验原理:茜素红是一种广泛应用于生物医学样本检验的示钙染剂,游离的钙离子不能与茜素红形成红色沉淀,而固化的钙质结节则能被染成红色。细胞在诱导培养基作用下,会逐渐向骨细胞方向分化,产生明显的泌钙反应,形成钙盐结晶或钙质结节,均能被茜素红染色。
使用说明
1. 成骨诱导分化操作
1.1 明胶包被培养器皿 细胞培养较长时间后,可能会出现脱壁卷边或 漂浮现象,建议使用0.1%明胶溶液对培养器皿进行 包被。准备合适的培养器皿,取适量明胶 覆盖底面,37°C静置30 min,吸取晾干即可使用。
1.2 接种干细胞 取 对 数 生 长 期 的 细 胞 , 按 照 2.0×10e4 cells/cm2的细胞密度接种至包被后的培养器皿中, 于 37℃,5% CO2 培养环境下培养至汇合度 60~70%,弃掉上清,加入成骨诱导分化培养基。
1.3 细胞分化诱导 于37℃,5% CO2培养环境下培养约14~21天, 每2~3天换液一次,并注意观察细胞形态变化。根据细胞钙盐结晶析出和钙质结节形成的情况, 决定终止细胞诱导的时间,并进行染色鉴定。
2. 染色鉴定
2.1 细胞固定 吸去培养基使用适量1×PBS清洗一次,弃去 后取适量4%中性甲醛溶液覆盖培养器皿底面,室 温固定30~60 min,弃去固定液再使用1×PBS清洗 两次。
2.2 茜素红染色 加入适量茜素红染色液染3~5 min,吸走茜 素红染色液,用1×PBS清洗两次,并加入适量1× PBS避免细胞干燥。
2.3 诱导评估 显微镜下观察成骨染色效果,并进行图像采 集和诱导评估。诱导成功时,钙质结节与茜素红 染料结合后呈现红色或橘红色。
NOTE: 细胞的成骨分化水平因细胞类型、细胞供体来 源,培养条件、细胞代次、细胞状态和分化时间等因素而 异。