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| 规格 | 价格 | 库存 |
|---|---|---|
| 100T | ￥ 360 | 6 |
维生素C检测试剂盒(磷钼酸微板法)
一、产品简介：
维生素 C(Vitamin C)又称L-抗坏血酸，是高等灵长类动物与其他少数生物的必需营养
素，在生物体内维生素C是一种抗氧化剂，为酸性已糖衍生物，是稀醇式已糖酸内酯，保
护身体免于自由基的威胁，同时也是一种辅酶，其广泛的食物来源为各类新鲜蔬果。Vc有
L-型和 D-型两种异构体，只有L-型的才具有生理功能，还原型和氧化型都有生理活性。
雅吉维生素 C检测试剂盒(磷钼酸微板法)检测原理是在强酸和偏磷酸根离子存在
条件下，钼酸铵能与还原型维生素C反应生成蓝色化合物，在一定浓度范围吸光度值与浓
度呈线性关系，以酶标仪 760nm 处检测吸光度，获得 Vitamin C含量。该试剂盒主要用于
植物组织中的还原型维生素 C(抗坏血酸)的检测，
其优点是:
1、反应迅速;
2、操作简便
3、还原糖及其他常见的还原物质对实验没有干扰，专一性好。
本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途，
三、自备材料：
蒸馏水
电子天平、研磨器或匀浆器
离心机、离心管或试管、水浴锅或恒温箱、酶标仪、96 孔板
四、操作步骤(仅供参考)：
1、配制组织匀浆液:按组织匀浆液 A:组织匀浆液 B:蒸馏水=8:1:91 的比例混匀即得,
2、准备样品:取待测材料如青菜、水果、松针等，消洗擦干，准确称量 1g，加入研磨器
内，再加入少量组织匀浆液，研磨碎，留取上清，再次用组织匀浆液研磨，最后一并倒入 10ml离心管,补充组织匀浆液至 10ml,充分混匀,4000r/min 离心 5min,取 0.05ml
上清液，加入等量蒸馏水，即为待测液。
3、配制 MPA 工作液:称取 0.2g MPA 粉末，充分溶解于 10m 酸性缓冲液I中，也可根
据使用情况称取一定量的 MPA 按比例溶解即可，4℃保存 3~4 天有效。
4、配制 Vitamin CAssay buffer:取钼酸铵粉末 0.5g，充分溶解于 10ml 蒸馏水中，也
可根据使用情况称取一定量的钼酸铵加水按比例溶解即可，4℃避光保存。注意:钼酸
铵溶于水会逐渐变化成乳白色浊液，则不能使用。
5、配制系列 Vitamin C 标准:将 25mg Vitamin C 标准用 1ml 组织匀浆液溶解即得
Vitamin C标准(25mg/ml)，再用蒸馏水稀释成 Vitamin C标准(250ug/ml)，取干净
离心管或试管，按下表进行操作，依次稀释。Vitamin C标准(25mg/ml)放置-20℃
短期保存。
| 加入物（μL） | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
| VitaminC标准(250μg/ml) | 20 | 30 | 40 | 50 | 60 | 80 | 100 |
| 蒸馏水 | 80 | 70 | 60 | 50 | 40 | 20 | 0 |
| 相当于 VitaminC浓度(μg/ml) | 50 | 75 | 100 | 125 | 150 | 200 | 250 |
6、Vitamin C加样:按照下表设置空白孔、标准孔、测定孔，溶液应按照顺序依次加入
并注意避免产生气泡。如果样品中的 Vitamin C含量过高，可以减少样品用量或适当稀
释后再进行测定，样品的检测最好能设置2平行孔，求平均值。
| 加入物（μL） | 空白孔 | 标准孔 | 测定孔 |
| 蒸馏水 | 40 | —— | —— |
| 系列 Vitamin C标准(1~7号) | —— | 40 | —— |
| 待测液 | —— | —— | 40 |
| 1x组织匀浆液 | 80 | 80 | 80 |
| MPA 工作液 | 40 | 40 | 40 |
| 酸性缓冲液Ⅱ | 20 | 20 | 20 |
| Vitamin C Assay buffer | 80 | 80 | 80 |
7、vitamin C测定:立即混匀，30℃水浴 20min，空白调零，以酶标仪测定 760nm 处系
列标准孔、测定孔的吸光度。
五、计算：
计算:以系列标准Vitamin C(50、75、100、125、150、200、250μg/ml)为横坐标
以对应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，求得回归方程，以测定孔的吸光度代入回归方程
求得样品维生素C含量。
100g样品中维生素C含量(mg)
=(c0×V1)×100/(m1x1000)=(c0×V1)/(m1x10)
式中:c0:待测样品的吸光度值在标准曲线上査出的维生素℃的浓度(μg/ml)
V1:待测液的总体积(ml)
M1:样品质量(g)
1000:μg换算成mg
六、注意事项：
1、Vitamin ℃标准避免反复冻融，以免失效或效率下降,
2、组织匀浆液 A 保存温度过低时易产生结晶，可用温水浴溶解后再使用。
3、Vitamin C Assay buffer 室温保存时间过长或者过期会出现白色粘稠物，不可使用应换新的产品使用。不使用时建议 4℃℃保存。
4、待测样品如不能及时测定，应置于 2~8℃保存，3 天内稳定
5、如果样品浓度过高，应用蒸馏水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。
七、有效期：六个月有效。
