上海细胞库
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| 规格 | 价格 | 库存 |
|---|---|---|
| 100U | ￥ 800 | 2 |
| 1000U | ￥ 3980 | 1 |
| 热敏双链DNA特异性核酸酶(Heat labile ds-DNA-specific Nuclease，又名ezDNase或HL dsDNase)，为双链特异性核酸酶。其特异性的识别降解双链DNA，对单链DNA或RNA几乎无活性，其降解dsDNA的能力比ssDNA高~5000倍。除此外，该双链DNA特异性核酸酶降解双链DNA的能力比bovine DNaseI高~30倍，因此特别适用于去除RNA样品中的基因组DNA污染。该热敏型双链DNA核酸酶可将DNA降解为2~8bp的产物，且55℃ 5min可使该酶不可逆失活，同时又能保持RNA和ssDNA的稳定性，因此产物无需再纯化，可直接用于后续反应。同时该酶与M-MLV和AMV的反应Buffer都是兼容的，可应用于反转录反应中去除样本中基因组DNA的污染，提高反转录效率。 | |||||||
单位定义 | |||||||
| 1单位指在25℃标准反应条件下，每分钟OD260增加0.001（约每分钟消化1pmol核酸底物）所需的酶量。 | |||||||
组分 | |||||||
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储存 | |||||||
| 置于-20°C，可保存3年。 | |||||||
使用注意事项 | |||||||
| （（1）1×dsDNase Buffer：20mM Tris-HCl pH8, 2mM MgCl2。该酶需要1~3mM MgCl2。 （2）该酶对DTT敏感，任何反应体系中不得包含DTT。 （3）通常在RT反应中的用量为0.1~0.5U/20 μl体系。 （4）任何浓度的SDS、盐酸胍、β-mercaptoethanol或高盐离子（>300mM）均抑制该酶活性。 （5）该酶的最佳反应温度为25~37℃，42℃ 30min后活性损失70%。 | |||||||
实例 | |||||||
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| 取人基因组2.5 μg，分别用0、0.125、0.25、0.5、1 μl的热敏双链DNA特异性核酸酶37℃消化15min，如图所示。 | |||||||
