Ni-NTA纯化树脂,Ni-NTA Resin,是用于纯化6xHis标签重组蛋白的一种纯化介质,它是由4%交联的Sepharose耦连了一种四齿螯合剂NTA而得. Ni-NTA树脂用于在非变性或变性条件下纯化任何表达系统表达的6xHis标签重组蛋白。NTA,含有四个螯合区,较一般的三齿螯合剂能更好的结合Ni2+。6xHis可与Ni2+螯合,从而使His标签蛋白结合在Ni-NTA纯化介质上,未结合的蛋白被洗涤下去,结合在介质上的蛋白经过一定浓度的咪唑或低PH缓冲液被温和的洗脱下来,从而得到高纯度的目的蛋白。 |
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组分 |
50%的悬浮液(20%乙醇),已螯合Ni2+。 |
主要特征 |
- 该纯化介质与His标签蛋白具有极高的亲和力,可达5~20 mg/ml。
- 可在非变性和变性条件下纯化任何表达系统所得的His标签蛋白。
- 纯化程序简单,所得的蛋白纯度可高达95%。
- Ni-NTA Resin可再生4-6次,重复使用。
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应用 |
- His标签蛋白的纯化。
- 蛋白结构与功能研究。
- 蛋白-蛋白以及蛋白-DNA之间相互作用的研究。
- 配体-受体之间相互作用的研究。
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储存 |
4°C保存,切勿冻存。 |
实例 |
| Fig.PET28a系统于BL21(DE3)中诱导表达蛋白。M:中分子量蛋白Marker(C0101),泳道1-5分别为:未诱导全菌蛋白,加IPTG诱导全菌蛋白,过柱液,洗涤液,洗脱液 |