T4 噬菌体复制分为依赖于起始子的起始复制和依赖于重组酶的复制。由起始复制产生的3'-ssDNA作为重组复制的第一步链侵入的组份, 该3'-ssDNA被T4 gp32 蛋白所覆盖,同时将T4 UvsY募集到此;T4 UvsY作为T4 UvsX的loader将其运载至此,于此同时gp32被置换下来, UvsX和UvsY形成突触结构, 然后侵入同源的双链形成D-Loop, 一旦形成D-Loop, UvsX即被置换下来。D-loop被置换链作为滞后链合成的模板,很快被gp32结合。随后, 解旋酶loader gp59与gp32覆盖的DNA复制叉结合,将gp41/61运载至此, gp61蛋白合成寡核苷酸片段促进滞后链DNA的合成,而gp41通过解旋模板而促进先导链的DNA合成。最后,聚合酶的滑板蛋白gp45和其loder蛋白 gp44/62与先导链相结合,促进聚合酶gp43的组装,gp45将gp43运载至复制叉处后启动先导链和滞后链的合成,gp44/62随后从复制叉处解离。因此,gp44/62作为gp45的loader在聚合酶gp43引导的DNA合成中起到重要作用。 | ||||||
组分 | ||||||
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储存 | ||||||
-20℃可保存3年。 | ||||||
Storage Buffer | ||||||
200 mM Tris-HCl,pH7.5 200 mM NaCl 5 mM DTT 25% Glycerol |