产品分类/PRODUCT CLASSIFICATION
| Hi T7 RNA 聚合酶对T7噬菌体启动子具有高度的特异性，并可以其作为启动子，DNA作为模板体外合成正义链RNA。线性质粒、PCR产物双链DNA均可作为T7 RNA 聚合酶的底物模板。Hi T7 RNA聚合酶经电子重构架及库筛选，与Wild型相比，该酶的DNA模板结合区域亲和力更高，使其具有持续合成能力，从而获得更高的产量，并易于长片段RNA的合成。 Hi T7高产RNA合成试剂盒是基于Hi T7 RNA聚合酶而组建的试剂盒，20 μl反应即可获得150-200 μg的总产量（产量超过 MegaScript T7 Transcription kit）。利用该高产RNA试剂盒可在体外高效合成多种类型的 RNA，如mRNA、lncRNA、shRNA等。Hi T7 RNA聚合酶识别T7 promoter（TAATACGACTCA CTATA G G）以倒数第二个G碱基为起点开始转录，转录长度可达5000nt以上。利用该试剂盒得到的RNA适用于多种下游应用，如RNA结构和功能研究、核酸酶生物化学研究、RNase保护分析探针、印迹杂交、反义 RNA 及 RNAi 实验、微阵列分析、显微注射、体外翻译和 RNA 疫苗等。 | ||
应用 | ||
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1X T7 Transcription Buffer | ||
| 40 mM Tris (pH 7.8), 10 mM NaCl, 6mM MgCl2,2 mM Spermidine HCl, 10 mM DTT 。 | ||
酶储存液 | ||
| 10 mM Tris-HCl, 0.1 M NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 50% Glycerol, 0.01% (w/v) Triton X-100 , pH 7.5。 | ||
储存 | ||
| -20°C可保存2年，避免反复冻融。 | ||
热失活 | ||
| 75°C，10min。 | ||
实例 | ||
| 1.以不同大小的线性化质粒作为模板进行体外转录。 | ||
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| 2.以不同大小的PCR产物作为模板进行体外转录 | ||
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