产品分类/PRODUCT CLASSIFICATION
| 规格 | 价格 | 库存 |
|---|---|---|
| 50管/24样 | ￥ 400 | 10 |
测定意义：
蛋白质含有三种含硫氨基酸：甲硫氨酸、胱氨酸和Cys。其中，Cys是唯一一种含有巯基的含硫氨基酸，从甲硫氨酸转化而来，并且可与胱氨酸互相转化。Cys参与蛋白质二硫键的形成，经常是蛋白质活性中心的组成部分，还可以为其它生理生化反应提供巯基。此外，Cys大量积聚在皮肤和粘膜表面，在角蛋白生成中维持重要的琉基酶的活性，并且补充硫基，以维持皮肤的正常代谢，调节表皮最下层的色素细胞生成的底层黑色素。具有美白、解毒、改善炎症和过敏性皮肤等作用。
测定原理：
半胱氨酸与磷钨酸反应，可将磷钨酸还原成钨蓝，在600nm处有吸收峰，通过测定钨蓝的生成量，即可计算出半胱氨酸含量。
自备仪器和用品：
酶标仪、低温离心机、可调式移液枪、酶标板和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体×1瓶，4℃保存。
标准品：液体×1支，1μmol/mL半胱氨酸标准液，4℃保存。
样品中半胱氨酸提取：
1. 液体样品：取50μL液体样品，加试剂一450μL，充分混匀，11000 rpm 4℃离心10min，取上清液，即待测液。
2. 组织样品：称取约50mg组织，加入500μL试剂一，冰上充分研磨，11000 rpm 4℃离心10 min，取上清液，即待测液。
测定：
1. 酶标仪预热30min以上，调节波长到600 nm，蒸馏水调零。
2. 空白孔：取酶标板，在空白孔中加入20μL蒸馏水，90 μL试剂二，90 μL试剂三，室温静置15min，于600 nm测定光吸收，记为A空白。
3. 标准孔：取酶标板，在空白孔中加入20μL标准品，90 μL试剂二，90 μL试剂三，室温静置15min，于600 nm测定光吸收，记为A标准。
4. 测定孔：取酶标板，在空白孔中加入20μL待测液，90 μL试剂二，90 μL试剂三，室温静置15min，于600 nm测定光吸收，记为A测定。
半胱氨酸含量计算：
1. 按液体样品的体积计算：
半胱氨酸含量(μ mol/mL)
=C标准×(A测定－A空白)÷(A标准－A空白)×(500μL÷20μL)×（1mL÷50 μL）
=500×(A测定－A空白)÷(A标准－A空白)
C标准：标准品浓度，1μmol/mL；V标准：加入标准品体积（mL），20μL=0.02 mL。
2. 按鲜重计算：
半胱氨酸含量(μ mol/g FW)
= C标准×(A测定－A空白)÷(A标准－A空白)×(500μL÷20μL)÷W
=25×(A测定－A空白)÷(A标准－A空白) ÷W
W：组织样品质量（g）。
