产品分类/PRODUCT CLASSIFICATION
| 规格 | 价格 | 库存 |
|---|---|---|
| 50管/48样 | ￥ 1200 | 10 |
如需详细说明书，请联系客服
注 意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
MDHAR 催化 MDHA 还原生成 AsA，在抗坏血酸氧化还原代谢中具有重要作用。
测定原理：
MDHAR 催化 NADH 还原 MDHA 生成 AsA 和 NAD+，NADH 在 340 nm 有特征吸收峰，但是 NAD+没有。通过测定 340 nm 光吸收下降速率，来计算出 MDHAR 活性。
实验中所需仪器及设备：
研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、可调式移液枪和双蒸水
试剂组成和配置：
试剂一：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 20mL×1 瓶，室温保存。
试剂三：粉剂×1 瓶（棕色），4℃保存。临用前加入 3 mL 蒸馏水充分溶解。
试剂四：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加入 2.5 mL 蒸馏水充分溶解。
试剂五：液体 15μL×1 瓶，4℃保存。临用前加 3 mL 试剂二充分溶解。
粗酶液提取：
1. 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一）进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心 10min，取上清置冰上待测。
2.. 细菌、真菌：按照细胞数量（104 个）：试剂一体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建
议 500 万细胞加入 1mL 试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；8000g ，4℃离心 20min，取上清液置冰上混匀待测。
3. 血清等液体：直接测定。
MDHAR 测定操作：
1. 分光光度计/酶标仪预热 30 min，调节波长到 340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在 25℃水浴锅中预热 30 min。
3.依次在微量石英比色皿/96 孔板中加入 20μL 试剂三、20μL 试剂四、20μL 试剂五和 120μL 试剂二，最后加入 20μL 上清液，迅速混匀后于 340nm 比色，记录 30s 和 150s 的吸光值 30s
和 150s 的吸光值 A1 和 A2，△A=A1-A2。
MDHAR 活性计算公式：
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下
